[发明专利]一种D-葡萄糖的检测方法和应用有效
| 申请号： | 202010013434.0 | 申请日： | 2020-01-07 |
| 公开（公告）号： | CN111189783B | 公开（公告）日： | 2022-07-19 |
| 发明（设计）人： | 程佳吉;王秋实;郝俊杰;林家颖 | 申请（专利权）人： | 湖北大学 |
| 主分类号： | G01N21/19 | 分类号： | G01N21/19 |
| 代理公司： | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人： | 巩克栋 |
| 地址： | 430062 湖北*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 葡萄糖 检测 方法 应用 | ||
1.一种D-葡萄糖的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括利用手性半胱氨酸封端的二氧化钼进行检测。
2.根据权利要求1所述的D-葡萄糖的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括如下步骤：
(1)绘制标准曲线；
(2)将待测样品与手性半胱氨酸封端的二氧化钼混合，检测混合溶液的圆二色光谱；
(3)通过步骤(2)中得到的圆二色光谱的CD峰绝对值，对应标准曲线，确定待测样品中D-葡萄糖的浓度。
3.根据权利要求2所述的D-葡萄糖的检测方法，其特征在于，所述标准曲线以D-葡萄糖的浓度为横坐标，以手性半胱氨酸封端的二氧化钼的圆二色光谱的CD峰绝对值为纵坐标。
4.根据权利要求2或3所述的D-葡萄糖的检测方法，其特征在于，所述标准曲线的绘制方法包括如下步骤：
(A)分别配置不同浓度的D-葡萄糖溶液，所述D-葡萄糖溶液中包括葡萄糖氧化酶；
(B)将D-葡萄糖溶液与手性半胱氨酸封端的二氧化钼混合，利用圆二色光谱检测手性半胱氨酸封端的二氧化钼的CD峰绝对值；
(C)以D-葡萄糖的浓度为横坐标，以CD峰绝对值为纵坐标，绘制标准曲线。
5.根据权利要求4所述的D-葡萄糖的检测方法，其特征在于，步骤(A)所述D-葡萄糖溶液中D-葡萄糖的浓度为0-100000μM。
6.根据权利要求5所述的D-葡萄糖的检测方法，其特征在于，步骤(A)所述D-葡萄糖溶液中D-葡萄糖的浓度为200-1000μM。
7.根据权利要求4所述的D-葡萄糖的检测方法，其特征在于，步骤(A)中配制3种以上不同浓度的D-葡萄糖溶液。
8.根据权利要求7所述的D-葡萄糖的检测方法，其特征在于，步骤(A)中配制5种以上不同浓度的D-葡萄糖溶液。
9.根据权利要求8所述的D-葡萄糖的检测方法，其特征在于，所述D-葡萄糖溶液中，所述葡萄糖氧化酶的浓度为50-400U/mL。
10.根据权利要求4所述的D-葡萄糖的检测方法，其特征在于，步骤(B)中的混合溶液中，所述手性半胱氨酸封端的二氧化钼的浓度为0.1-100mmol/L。
11.根据权利要求10所述的D-葡萄糖的检测方法，其特征在于，步骤(B)中的混合溶液中，所述手性半胱氨酸封端的二氧化钼的浓度为10mmol/L。
12.根据权利要求4所述的D-葡萄糖的检测方法，其特征在于，步骤(B)所述混合的时间为10-120min。
13.根据权利要求12所述的D-葡萄糖的检测方法，其特征在于，步骤(B)所述混合的时间为30min。
14.根据权利要求1所述的D-葡萄糖的检测方法，其特征在于，所述手性半胱氨酸封端的二氧化钼包括L-半胱氨酸封端的二氧化钼和/或D-半胱氨酸封端的二氧化钼。
15.根据权利要求1所述的D-葡萄糖的检测方法，其特征在于，所述手性半胱氨酸封端的二氧化钼的制备方法如下：
利用手性半胱氨酸与三氧化钼反应，得到手性半胱氨酸封端的二氧化钼。
16.根据权利要求15所述的D-葡萄糖的检测方法，其特征在于，所述手性半胱氨酸和所述三氧化钼的摩尔比为(50-200):3。
17.根据权利要求15所述的D-葡萄糖的检测方法，其特征在于，所述反应包括超声5min后在避光反应下孵育1周。
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