[发明专利]一株乙酰微小杆菌及其在防治植物寄生线虫病上的应用

权利要求书

1.一株乙酰微小杆菌(Exiguobacterium acetylicum)AMCC 101217，于2018年08月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，菌种保藏编号为CGMCC No.16305。

2.权利要求1所述乙酰微小杆菌AMCC 101217微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)菌种活化：将乙酰微小杆菌(Exiguobacterium acetylicum)AMCC 101217接种于LB固体培养基平板上，于35-37℃培养22-27h；

(2)种子液制备：将活化好的AMCC101217接种于LB液体培养基中，于35-37℃，150-220rpm培养18-22h；

(3)种子液扩大培养：将步骤(2)中的种子液以5-8％的接种量接种到种子液扩大培养基中，所述的扩大培养基为LB液体培养基，于35-37℃，150-220rpm培养10-13h；

(4)发酵培养：将步骤(3)中扩大培养的种子液以5-8％的接种量接种到LANDY发酵培养基，35-37℃，150-220rpm培养22-27h，得到AMCC101217液体菌剂；

所述LANDY发酵培养基，每升包括如下组分：葡萄糖18.0-20.0g，L-谷氨酸4.0-5.0g，磷酸二氢钾0.8-1.0g，七水硫酸镁0.4-0.5g，氯化钾0.4-0.5g，酵母粉1.0-1.2g，L-苯丙氨酸(1.8-2.4)×10^-3g，硫酸锰(4.5-5)×10^-3g，硫酸铜(0.16-0.18)×10^-3g，七水硫酸亚铁(0.15-0.17)×10^-3g，余量水，pH6.8-7.3。

3.如权利要求2所述乙酰微小杆菌AMCC 101217微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)接种后LB固体培养基平板，于37℃培养24h。

4.如权利要求2所述乙酰微小杆菌AMCC 101217微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)接种后的LB液体培养基于37℃，180rpm培养18h。

5.如权利要求2所述乙酰微小杆菌AMCC 101217微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)接种后的种子液扩大培养基，于37℃，200rpm，培养10h。

6.如权利要求2所述乙酰微小杆菌AMCC 101217微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述步骤(4)中发酵培养于37℃，200rpm培养24h。

7.如权利要求2所述乙酰微小杆菌AMCC 101217微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述步骤(4)中的LANDY发酵培养基，每升包括如下组分：葡萄糖20.0g，L-谷氨酸5.0g，磷酸二氢钾1.0g，七水硫酸镁0.5g，氯化钾0.5g，酵母粉1.0g，L-苯丙氨酸2×10^-3g，硫酸锰5×10^-3g，硫酸铜0.16×10^-3g，七水硫酸亚铁0.15×10^-3g，余量水，pH7.0。

8.一种液体微生物菌剂，其特征在于，含有权利要求1所述乙酰微小杆菌AMCC101217菌株，菌体浓度为1.0×10⁷-2.5×10⁸CFU/mL。

9.权利要求1所述乙酰微小杆菌AMCC101217菌株在防治由一种或多种线虫引起的病害中的应用；

优选的，所述线虫为：南方根结线虫、象耳豆根结线虫、松材线虫之一或两种以上的组合。

10.权利要求8所述乙酰微小杆菌AMCC101217菌剂在防治由一种或多种线虫引起的病害中的应用；

优选的，所述线虫为：南方根结线虫、象耳豆根结线虫、松材线虫之一或两种以上的组合。