[发明专利]针对人TRBV9的β链区域的单克隆抗体

说明书

本发明涉及特异性地结合人T细胞受体的TRBV9家族的单克隆人源化抗体或其抗原结合片段。本发明也涉及编码所述抗体或其抗原结合片段的核酸、表达载体、用于制备所述抗体的方法和所述抗体在治疗与人T细胞受体的所述家族有关的疾病或障碍中的用途。本发明涉及产生抗体，所述抗体可以用于治疗尤其是强直性脊柱炎(AS或别赫捷列夫氏病)、乳糜泻和血液癌症，其发病机制涉及TRBV9家族的T细胞受体。

技术领域

本发明涉及生物技术和生物医学的领域，具体地涉及抗体或其抗原结合片段，以及涉及其用途。更具体地，本发明涉及特异性地结合人T细胞受体家族的单克隆人源化抗体。本发明也涉及编码所述抗体或其抗原结合片段的核酸，表达载体，用于制备所述抗体的方法，和所述抗体在治疗与人T细胞受体家族有关的疾病或障碍中的用途。

背景技术

自身免疫疾病由自体反应性T淋巴细胞造成(Haroon N等人, Arthritis Rheum.2013年10月; 65(10):2645-54., Duarte J. 等人, PloS One 2010年5月10日; 5(5):e10558; Konig M. 等人, Front Immunol 2016年1月25日;7:11)。现有技术公开了T细胞受体(TCR)序列是允许鉴定参与自身免疫疾病的发病机制的T-淋巴细胞克隆的标志物。在结构上，T-细胞受体的亚基是免疫球蛋白超家族的成员，且由几个基因区段形成。TCR可变区形成TCR抗原结合位点。这意味着，它们是克隆-特异性的，即不同在于对独特抗原做出应答的T淋巴细胞。

根据在TCR可变结构域内的可变(V)基因区段的氨基酸同源性，将T细胞受体分成不同的家族。根据IMGT命名法，将β-链分类成26个独特家族，并将α链分类成41个家族(Turner SJ等人, Nature Reviews Immunology 2006, V.6, 883-894)。为了确定TCR链家族，人们使用试验氨基酸序列和已知TCR链序列的多重比对，关于已知TCR链序列的信息总结在IMGT数据库中(“The international ImMunoGeneTics information system”,Lefranc M-P., Nucl Acids Res 2001; 29:207-209)，该数据库可在http://www.imgt.org在因特网上得到。使用IgBlast软件包可以执行TCR链家族的多重比对和确定。

WO9006758公开了针对属于TRBV5-3和TRBV8-1家族的人T细胞受体可变结构域的β-链区域的单克隆抗体W112和2D1，被提议作为类风湿性关节炎的诊断和治疗工具。所述单克隆抗体分别识别0.3-5%的带有TRBV5-3的周围T淋巴细胞和0.5-13%的带有TRBV8-1的周围T淋巴细胞。许多证实T淋巴细胞在类风湿性关节炎的发病机制中的参与的研究的结果导致对T受体的β-链区域特异性的单克隆抗体的应用。具体地，Brennan等人, Clin ExpImmunol. 1988年9月; 73(3): 417-423已经证实了与健康个体相比在遭受类风湿性关节炎的患者的滑液样品中带有TRBV5和TRBV8的T淋巴细胞的升高的百分比。WO9405801公开了与人T-细胞受体的VΒ3.1可变区的表位相互作用的用于诊断和治疗类风湿性关节炎的单克隆抗体，其与TCR V(β)3.1亚家族相互作用。

还已经描述了特异性地识别大鼠TRC的第13个家族β-链的单克隆抗体。动物模型已经证实，在这些抗体的帮助下，可预防性地除去其T受体包含VB13β-链的T细胞的小群体(VB13+ T细胞)，且已经证实，这样的程序会保护免于I型糖尿病在糖尿病倾向系的大鼠中的发生，且也显著地降低病毒诱导的糖尿病的发生风险(Zhijun Liu等人, Diabetes.2012年5月; 61(5): 1160-1168.)。与此同时，其T受体包含独特β-链家族(VB16)的T细胞的除去结果没有不同于对照组的结果。重要的是，注意到，甚至针对VB13的单克隆抗体的第一次施用导致大鼠脾中的VB13+ T细胞数目的60%下降。