[发明专利]纯化过敏原提取物的方法

说明书

本发明涉及生产用于诊断和治疗过敏症的半纯化和纯化过敏原提取物以及药物组合物和疫苗的方法。在本发明的一个方面，提供了一种生产脱色过敏原提取物的方法，所述方法包括：a)碱化天然过敏原提取物；并且b)去除分子大小小于3.5kDa的分子；并且c)调节pH至中性；从而产生脱色过敏原提取物。

技术领域

本发明涉及生产用于诊断和治疗过敏症的半纯化和纯化过敏原提取物以及药物组合物和疫苗的方法。

背景技术

过敏症是免疫系统的获得性超敏障碍，并且由暴露于称为过敏原的无害环境物质触发。I型超敏反应是过敏反应的特征，并且导致产生过量的IgE抗体，进而激活嗜碱性粒细胞和肥大细胞，引起炎症反应。效应可能是全身性的，如血管舒张、粘液分泌、神经刺激或平滑肌收缩，从而导致过敏性反应，或者效应可能限于身体的特定区域，例如呼吸系统。

梯牧草(Phleum pratense)

草过敏是在某些季节期间影响敏感人群的最常见和流行的过敏症形式之一。春末夏初空气中存在草的花粉，可引起过敏性鼻炎、过敏性结膜炎和哮喘。坐在草上或修剪草坪时，皮肤与草直接接触会导致皮肤瘙痒、荨麻疹和特应性皮炎。最具代表性的草的物种之一是梯牧草。在梯牧草物种中已鉴定出至少九种不同的过敏原，并且包括：Phl p 1，其为27kDa的β扩展蛋白；Phl p 2，其为10-12kDa的草族II/III；Phl p 4，其为55kDa的蛋白质；32kDa的Phl p 5；11kDa的Phl p 6；Phl p 7，其为6kDa的钙结合蛋白；Phl p 11，其为20kDa的Ole e 1相关蛋白；Phl p 12，其为14kDa的前纤维蛋白；以及Phl p 13，其为55kDa的聚半乳糖醛酸酶。

油橄榄(Olea europaea)

在地中海地区，由于橄榄树的广泛种植，橄榄花粉症是一个重要的健康问题。橄榄树向大气中释放大量花粉。目前，WHO/IUIS过敏原命名小组委员会已经描述了来自油橄榄的12种过敏原；11种来自花粉，1种(奇异果甜蛋白，也称为Ole e 13)来自橄榄果的食物过敏原。Ole e 1是主要过敏原，被超过70％的橄榄花粉致敏患者所识别。其他过敏原包括前纤维蛋白(Ole e 2)、polcalcin(Ole e 3和Ole e 8)、葡聚糖酶(Ole e 4和Ole e 9)、超氧化物歧化酶(Ole e 5)、脂质转移蛋白(Ole e 7)、糖基水解酶(Ole e 10)、果胶甲酯酶(Olee 11)和Ole e 6。

屋尘螨(Dermatophagoides pteronyssinus)

螨是全世界致敏的主要来源，尤其是在湿度和温度有利于其发育的地区。目前，属于尘螨科的屋尘螨(HDM)是室内生境中最丰富的螨，因此是过敏原的主要室内来源。已经由WHO/IUIS过敏原命名小组委员会描述了在屋尘螨中的十九种过敏原，其中的9种是蛋白酶，具有与过敏原性相关的活性。最重要的过敏原是Der p 1(25kDa半胱氨酸蛋白酶)和Der p2(14kDa的NPC2家族蛋白)。

过敏患者可以通过药物治疗以减轻其症状并控制症状高峰，或者可以通过特异性免疫疗法进行治疗。然而，特异性免疫疗法是唯一能够改变疾病进程的治疗。特异性免疫疗法(SIT)涉及施用不断变大的剂量的过敏原提取物，目的是诱导免疫耐受。过敏原免疫疗法调节对过敏原的免疫应答，而不是改善由过敏反应诱发的症状，并且可以减少对药物的需求、减轻症状的严重程度或完全消除超敏性。

免疫疗法的风险之一是向致敏患者注射过敏原会引起过敏反应或过敏性。自20世纪初首次使用以来，为了进一步提高过敏原免疫疗法的安全性和功效，人们做出了许多努力。一种方法是开发类过敏原，这涉及使用过敏原性降低但保留免疫原性的过敏原疫苗。