[发明专利]新一代可调节的促进融合的溶瘤单纯疱疹病毒1型病毒及使用方法

权利要求书

1.包含重组DNA的溶瘤单纯疱疹病毒(HSV)，其中所述重组DNA包含：

a)含有5’非翻译区和HSV-1或HSV-2的基因，即VP5基因，其与包含TATA元件的VP5启动子可操作地连接；

b)定位在所述TATA元件3’端的6至24个核苷酸之间的四环素操纵子序列，其中所述VP5基因位于所述四环素操纵子序列的3’端；

c)编码与HSV立即早期启动子可操作地连接的四环素阻遏物的基因序列，其中所述基因序列位于ICP0基因座处；

d)与野生型相比增加合胞体形成的变异基因，其中所述HSV-1或HSV-2变异基因选自：糖蛋白K(gK)变体；糖蛋白B(gB)变体；UL24变体；和UL20基因变体；以及

e)编码功能性ICP34.5蛋白的基因序列；

其中所述溶瘤HSV不编码功能性ICP0并且不含有位于VP5的所述5’非翻译区中的核序列。

2.根据权利要求1所述的溶瘤HSV，其中所述变异基因是编码选自以下的氨基酸取代的gK变异基因：对应于SEQ ID NO:2的氨基酸40的Ala至Thr的氨基酸取代，对应于SEQ ID NO:2的氨基酸40的Ala至“x”的氨基酸取代；其中“x”是任意氨基酸；对应于SEQ ID NO:2的氨基酸99的Asp至Asn的氨基酸取代；对应于SEQ ID NO:2的氨基酸304的Leu至Pro的氨基酸取代；以及对应于SEQ ID NO:2的氨基酸310的Arg至Leu的氨基酸取代。

3.根据权利要求1-2中任一项所述的溶瘤HSV，其中所述四环素操纵子序列包括两个Op2阻遏物结合位点。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的溶瘤HSV，其中所述VP5启动子是HSV-1或HSV-2VP5启动子。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的溶瘤HSV，其中所述立即早期启动子是HSV-1或HSV-2立即早期启动子。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的溶瘤HSV，其中所述HSV立即早期启动子选自：ICP0启动子和ICP4启动子。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的溶瘤HSV，其中所述重组DNA是HSV-1基因组的一部分。

8.根据权利要求1-6中任一项所述的溶瘤HSV，其中所述重组DNA是HSV-2基因组的一部分。

9.根据权利要求1-8中任一项所述的溶瘤HSV，其还包含药学上可接受的载体。

10.根据权利要求1-9中任一项所述的溶瘤HSV，其还编码至少一种多肽，所述多肽能够增加所述溶瘤HSV诱导抗肿瘤特异性免疫的功效。

11.根据权利要求10所述的溶瘤HSV，其中所述至少一种多肽编码选自以下的产物：白细胞介素2(IL2)、白细胞介素12(IL12)、白细胞介素15(IL15)、抗PD-1抗体或抗体试剂、抗PD-L1抗体或抗体试剂、抗OX40抗体或抗体试剂、CTLA-4抗体或抗体试剂、TIM-3抗体或抗体试剂、TIGIT抗体或抗体试剂、可溶性白细胞介素10受体(IL10R)、可溶性IL10R与IgG-Fc结构域之间的融合多肽、可溶性TGFβII型受体(TGFBRII)、可溶性TGFBRII与IgG-Fc结构域之间的融合多肽、抗IL10R抗体或抗体试剂、抗IL10抗体或抗体试剂、抗TGFBRII抗体或抗体试剂以及抗TGFBRII抗体或抗体试剂。

12.根据权利要求1-11中任一项所述的溶瘤HSV，其中所述溶瘤HSV还编码促进融合的活性。

13.组合物，其包含权利要求1-12中任一项所述的溶瘤HSV。

14.根据权利要求13所述的组合物，其还包含药学上可接受的载体。