[发明专利]蛋白质赖氨酸乳酸酰化检测试剂和方法在审
申请号: | 201980087999.9 | 申请日: | 2019-12-19 |
公开(公告)号: | CN113748129A | 公开(公告)日: | 2021-12-03 |
发明(设计)人: | 赵英明;张迪;戴伦治 | 申请(专利权)人: | 杭州景杰生物科技股份有限公司 |
主分类号: | C07K16/18 | 分类号: | C07K16/18;C07K16/14;C07K16/20;G01N33/68;G01N33/53;C07K14/47;C07K14/435;C07K14/395;C07K14/44 |
代理公司: | 杭州天昊专利代理事务所(特殊普通合伙) 33283 | 代理人: | 向庆宁 |
地址: | 310000 浙江省杭州市钱塘新区杭*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 蛋白质 赖氨酸 乳酸 检测 试剂 方法 | ||
1.一种分离的亲和试剂,其可特异性地结合肽中的乳酸酰化赖氨酸。
2.根据权利要求1所述的分离亲和试剂,其中肽衍生自组蛋白或其片段。
3.根据权利要求2所述的分离亲和试剂,其中组蛋白衍生自选定人类、小鼠、酿酒酵母、嗜热四膜虫、黑腹果蝇和秀丽隐杆线虫中。
4.根据权利要求1-3任一所述的分离亲和试剂,其中肽包含选自于序列号为:29-87的氨基酸序列,该序列需与氨基酸序列的同源度达70%以上。
5.根据权利要求1-3任一所述的分离亲和试剂,其中肽包含的氨基酸序列选自由序列号为:29-87组成的组。
6.根据权利要求1-5任一所述的分离亲和试剂,其中肽在所述乳酸酰化赖氨酸的N端和C端侧上皆包含至少一个或两个氨基酸残基。
7.根据权利要求1-6任一所述的分离亲和试剂,其中亲和试剂与所述肽的结合取决于所述肽中乳酸酰化赖氨酸的周围肽序列。
8.根据权利要求1-7任一所述的分离亲和试剂,其中亲和试剂为蛋白质。
9.根据权利要求1-8任一所述的分离亲和试剂,其中亲和试剂为抗体。
10.一种检测蛋白质或其片段中的乳酸酰化赖氨酸的方法,包括:
(a)将所述蛋白质或其片段与亲和试剂接触,其中所述亲和试剂特异性地结合到肽中的乳酸酰化赖氨酸中,由此形成所述蛋白质或其片段与所述亲和试剂的结合复合物,并且
(b)检测所述结合复合物,结合复合物的存在表明蛋白质或其片段中存在乳酸酰化赖氨酸。
11.根据权利要求10所述的方法,其中肽衍生自组蛋白或其片段。
12.根据权利要求11所述的方法,其中组蛋白衍生自选定人类、小鼠、酿酒酵母、嗜热四膜虫、黑腹果蝇和秀丽隐杆线虫中。
13.根据权利要求10-12任一所述的方法,其中肽包含选自于序列号为:29-87的氨基酸序列,该序列需与氨基酸序列的同源度达70%以上。
14.根据权利要求10-12任一所述的方法,其中肽包含的氨基酸序列选自由序列号为:29-87组成的组。
15.根据权利要求10-14任一所述的方法,其中肽在所述乳酸酰化赖氨酸的N端和C端侧上皆包含至少一个或两个氨基酸残基。
16.根据权利要求10-15任一所述的方法,其中亲和试剂与所述肽的结合取决于所述肽中乳酸酰化赖氨酸的周围肽序列。
17.根据权利要求10-16任一所述的方法,其中亲和试剂为蛋白质。
18.根据权利要求10-17任一所述的方法,其中亲和试剂为抗体。
19.根据权利要求10-18任一所述的方法,其进一步包含在蛋白质或其片段中量化乳酸酰化赖氨酸。
20.一种分离亲和试剂的方法,所述亲和试剂可特异性地结合到肽中的乳酸酰化赖氨酸中,所述方法包括:
(a)将蛋白库暴露于包含乳酸酰化赖氨酸的肽中,由此来自蛋白库中的蛋白质可特异性结合到乳酸酰化赖氨酸中并与肽形成结合复合物;和
(b)从结合复合物中分离出蛋白质,由此分离出的蛋白质即为亲和试剂。
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