[发明专利]用于细胞培养监测的过程中装置和方法

权利要求书

1.一种过程中细胞监测装置，包括：

监测流动通道，所述监测流动通道具有至少一个入口和至少一个出口，所述监测流动通道可暴露于细胞培养；

显微镜，所述显微镜可定位成查看所述通道的区域的内容；以及

计算机，所述计算机至少可操作以对所述区域中的任何细胞进行计数。

2.如权利要求1所述的装置，其中，所述流动通道被照明。

3.如权利要求1或2所述的装置，其中，所述流动通道至少在所述区域处是透明或半透明的，并且除了所述入口和出口之外是封闭通道。

4.如前述权利要求中的任一项所述的装置，其中，所述流动通道自排放，并且可选地没有包括池或尽头或者流体停滞的区。

5.如前述权利要求中的任一项所述的装置，其中，在所述区域处的所述流动通道在查看方向上具有大约1 mm至大约3 mm的深度，所述深度优选地在查看区域面积上是均匀深度。

6.如前述权利要求中的任一项所述的装置，其中，所述流动通道具有基本上均匀的截面面积，或者在所述区域处具有均匀锥形化的截面面积，并且在所述入口处以及可选地还在所述出口处的截面面积增加。

7.如前述权利要求中的任一项所述的装置，其中，所述至少一个入口和至少一个出口包括两个入口和两个出口。

8.一种生物反应器，所述生物反应器包括细胞培养体积和过程中细胞监测装置，所述装置包括：

流动通道，所述流动通道具有各自与所述体积进行流体连通的至少一个入口和至少一个出口，所述流动通道具有充分截面面积，以允许流体从所述入口排放到所述出口；以及

显微镜，所述显微镜可定位成查看所述通道的区域的内容。

9.如权利要求8所述的生物反应器，其中，所述通道的至少大多数被设置在所述培养体积内，以及所述显微镜可释放地保持到所述体积外部的保持装置。

10.一种包括如权利要求8或9所述的生物反应器的细胞培养设备，所述设备进一步包括以充分幅值可移动的生物反应器移动器，以便使所述生物反应器中的任何流体的一部分经过所述流动通道流动。

11.一种用于监测细胞培养的方法，所述方法包括确定细胞密度，所述方法按照任何适当顺序包括下列步骤：

a) 使流体经过预定截面面积的监测通道的区域流动；

b) 捕获所述区域的图像；

c) 使用计算机确定在预定时间内所成像的细胞的数量；

d) 使用来自多于一个图像的数据，确定经过测量通道的流动速度；

e) 使用所确定流动速度和所述区域处的截面面积，确定所述通道中的体积流率；以及

f) 从所成像细胞的所述数量和所述体积流率来确定所述细胞密度。

12.如权利要求11所述的方法，其中，确定所述流动速度的步骤包括以已知时间间隔的连续捕获细胞图像的分析，和/或确定所述体积流率的步骤包括将所述流动速度与所述截面面积相乘。

13.如权利要求11或12所述的方法，包括如下的另外的步骤：通过将光密度值指配给来自所捕获图像的连续像素且确定细胞壁面积的所述光密度值的变化率来确定所成像的所述细胞的活力。

14.如权利要求11、12或13中的任一项所述的方法，其中，在步骤a)中的流体流动是搅动生物反应器容器、例如所述生物反应器容器的倾斜的结果。

15.如权利要求14所述的方法，其中，所述流动中的所述流体在搅动的每个循环之后、例如在每次倾斜之后或者在单独数字数量的倾斜之后充分排放或者与其他流体交换。