[发明专利]内蛋白及其用途

权利要求书

1.一种在细胞中表达编码序列的载体系统，所述编码序列由第一部分(CDS1)、第二部分(CDS2)和任选的第三部分(CDS3)组成，所述载体系统包括：

a)第一载体，所述第一载体包括：

-所述编码序列的所述第一部分(CDS1)，

-编码N-内蛋白的第一内蛋白核苷酸序列，所述序列位于CDS1的3’末端；以及

b)第二载体，所述第二载体包括：

-所述编码序列的所述第二部分(CDS2)，

-编码C-内蛋白的第二内蛋白核苷酸序列，所述序列位于CDS2的5’末端；

其中当将所述第一载体和第二载体插入细胞中时，通过蛋白质剪接来产生所述编码序列的蛋白质产物；

或者所述载体系统包括：

a’)第一载体，所述第一载体包括：

-所述编码序列的所述第一部分(CDS1)，

-编码第一N-内蛋白的第一内蛋白核苷酸序列，所述序列位于CDS1的3’末端；以及

b’)第二载体，所述第二载体包括：

-所述编码序列的所述第二部分(CDS2)，

-编码第一C-内蛋白的第二内蛋白核苷酸序列，所述序列位于CDS2的5’末端；

-编码第二N-内蛋白的第三内蛋白核苷酸序列，所述序列位于CDS2的3’末端；以及

c’)第三载体，所述第三载体包括：

-所述编码序列的所述第三部分(CDS3)

-编码第二C-内蛋白的第四内蛋白核苷酸序列，所述序列位于CDS3的5’末端，

其中所述第一内蛋白核苷酸序列与所述第三内蛋白核苷酸序列不同，并且所述第二内蛋白序列与所述第四内蛋白核苷酸序列不同，其中当将所述第一载体、所述第二载体、所述第三载体插入细胞中时，通过蛋白质剪接来产生所述编码序列的所述蛋白质产物。

2.根据权利要求1所述的载体系统，其中所述第一内蛋白、所述第二内蛋白、所述第三内蛋白和所述第四内蛋白编码分裂型内蛋白，优选地，所述分裂型内蛋白的最大长度为150个氨基酸，更优选地，所述分裂型内蛋白是DnaE或DnaB内蛋白。

3.根据权利要求1或2所述的载体系统，其中

-所述第一内蛋白核苷酸序列编码选自由以下项构成的群组中的内蛋白：SEQIDNo1、3、5、7、9、11、13或其变体，或其片段或其同系物；

-所述第二内蛋白核苷酸序列编码选自由以下项构成的群组中的内蛋白：SEQ ID No2、4、6、8、10、12、14或其变体，或其片段或其同系物；

-所述第三内蛋白核苷酸序列编码选自由以下项构成的群组中的内蛋白：SEQ ID No1、3、5、7、9、11、13或其变体，或其片段或其同系物；

-所述第四内蛋白核苷酸序列编码选自由以下项构成的群组中的内蛋白：SEQ ID No2、4、6、8、10、12、14或其变体，或其片段或其同系物。

4.根据前述权利要求中的任一权利要求所述的载体系统，其中所述第一载体、所述第二载体和所述第三载体进一步包括启动子序列，所述启动子序列可操作地连接到所述编码序列的所述第一部分(CDS1)或者所述编码序列的所述第二部分(CDS2)或者所述编码序列的所述第三部分(CDS3)的5’末端部分。

5.根据前述权利要求中的任一权利要求所述的载体系统，其中所述第一载体、所述第二载体和所述第三载体进一步包括5’-末端重复(5’-TR)核苷酸序列和3'-末端重复(3’-TR)核苷酸序列，优选地所述5’-TR是5’-反向末端重复(5’-ITR)核苷酸序列，并且所述3’-TR是3’-反向末端重复(3’-ITR)核苷酸序列。

6.根据前述权利要求中的任一权利要求所述的载体系统，其中所述第一载体、所述第二载体和所述第三载体进一步包括聚腺苷酸化信号核苷酸序列，并且/或者其中所述第一载体或所述第二载体或所述第三载体中的至少一者进一步包括编码降解信号的核苷酸序列。

7.根据权利要求6所述的载体系统，其中所述降解信号选自由CL1、PB29、SMN、CIITA、ODc、ecDHFR或其片段构成的群组中。