[发明专利]多能干细胞用未分化维持培养基

说明书

本发明的课题在于，提供培养基中不含血清或白蛋白且显示高增殖性的多能干细胞的贴壁培养用培养基以及使用所述培养基的通用性高的多能干细胞的贴壁培养的方法。一直以来，通过向培养基中添加已知抑制细胞对细胞培养基材表面的粘附的亲水性聚合物，提高多能干细胞对细胞培养基材表面的粘附性，从而在多能干细胞的贴壁培养中不含血清或白蛋白的情况下，赋予高增殖性。此外，通过将抗氧化物质与所述聚合物添加至培养基中，在多能干细胞的贴壁培养中，赋予极高的增殖性。

技术领域

本发明涉及多能干细胞用未分化维持培养基。

背景技术

人工多能干细胞(iPS细胞)、胚胎干细胞(ES细胞)等多能干细胞具有分化多能性和自我复制能力，被期待应用于再生医疗等再生医疗领域和医学研究领域等。多能干细胞的培养必须在安全的条件下以维持未分化的状态增殖。

一直以来，细胞培养使用含血清或白蛋白的细胞培养基。白蛋白有来源于生物体的白蛋白和基因重组的白蛋白，如果是来源于生物体的白蛋白，供体感染病毒等的情况下，培养基中可能会含有这些病毒等。此外，即使不感染病毒等，白蛋白的纯化中也可能会有某些因子混杂而含于培养基，由所述因子导致细胞在不期望的时机分化。另外，由于来源于生物体，因此批次间会有微量成分的浓度等或品质的差异，培养结果可能因所述差异而变化。另一方面，基因重组的白蛋白的费用高昂。因此，多能干细胞的培养较好是使用不含白蛋白的培养基。

近年来，不断进行着适合于多能干细胞培养的无血清培养基的开发。专利文献1中揭示了一种无血清培养基，其中，包含针对内皮细胞分化基因(Edg)家族受体的配体、以及针对血清素受体的配体。专利文献2中揭示了一种不含白蛋白的无血清培养基，其中，包含普朗尼克(Pluronic)类非离子型表面活性剂或动物类水解产物等。专利文献3中揭示了一种通过使用含聚乙烯醇且不含白蛋白的培养基，在防止胚胎干细胞对培养皿的粘附的同时进行培养的方法。专利文献4中揭示了聚乙烯醇等合成聚合物抑制包括胚胎干细胞在内的细胞对细胞培养基材表面的粘附。专利文献5中揭示了一种培养基，其中，包含白蛋白和聚乙烯醇。

然而，尚无具有足以作为培养基中不含白蛋白且具有高增殖性而适合于贴壁培养等的通用性高的多能干细胞用培养基的品质的培养基。

现有技术文献

专利文献

专利文献1:国际公开第2009/084662号公报

专利文献2:国际公开第2017/195745号公报

专利文献3:日本专利特开2007-228815号公报

专利文献4:日本专利特开2007-124982号公报

专利文献5:日本专利特许第6197947号公报

发明的揭示

发明所要解决的技术问题

因此，本发明的课题在于，提供培养基中不含血清或白蛋白且显示高增殖性的多能干细胞的贴壁培养用培养基以及使用所述培养基的通用性高的多能干细胞的贴壁培养的方法。

解决技术问题所采用的技术方案

本发明人对于赋予多能干细胞对细胞培养基材表面的粘附性的非白蛋白成分进行了探索，发现亲水性聚合物提高多能干细胞对细胞培养基材表面的粘附性，通过将所述聚合物添加于培养基，在多能干细胞的贴壁培养中不含白蛋白的情况下，赋予高增殖性，进一步进行研究后，完成了本发明。

即，本发明涉及以下内容。

[1]一种多能干细胞贴壁培养用培养基，其中，含有亲水性聚合物，实质上不含白蛋白。

[2]根据上述[1]所述的培养基，其中，还含有抗氧化物质。