[发明专利]疫苗和方法

权利要求书

1.对能够诱导对病原体的广泛中和免疫应答的先导候选经优化抗原性病原体多肽进行鉴定的方法，其包括：

i)提供包含多个不同候选经优化抗原性病原体多肽的多肽文库，其中每个不同候选物的氨基酸序列已经从病原体多肽的多个不同氨基酸序列中优化并且不同于所述病原体多肽中的每个不同氨基酸序列，其中所述病原体多肽中的每个不同氨基酸序列包含不同分离株之多肽的氨基酸序列，并且其中每个不同分离株是这样的病原体的分离株，所述病原体与期望诱导对其广泛中和免疫应答的病原体为同一科；

ii)对所述多肽文库中候选经优化抗原性病原体多肽被一种或更多种广泛中和抗原结合分子的结合进行筛选，所述一种或更多种广泛中和抗原结合分子中的每一种能够结合和/或中和这样的病原体，所述病原体与期望诱导对其广泛中和免疫应答的病原体为同一科；以及

iii)将在步骤(ii)中被一种或更多种所述抗原结合分子结合的候选经优化抗原性病原体多肽鉴定为能够诱导对所述病原体的广泛中和免疫应答的先导候选经优化抗原性病原体多肽。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述一种或更多种广泛中和抗原结合分子包括获自对象的抗体或来源于获自对象之抗体的抗体，所述对象已经暴露于这样的病原体，所述病原体与期望诱导对其广泛中和免疫应答的病原体为同一科。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述一种或更多种广泛中和抗原结合分子包括非抗体抗原结合蛋白。

4.根据权利要求3所述的方法，其中所述一种或更多种广泛中和抗原结合分子包括经设计锚蛋白重复蛋白(DARPin)、抗运载蛋白、适配体或T细胞受体分子。

5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述多肽文库中的候选经优化抗原性病原体多肽被表达在哺乳动物细胞内或表面上。

6.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述多肽文库中的候选经优化抗原性病原体多肽已经被表达在细菌、酵母或昆虫细胞内或表面上。

7.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述病原体是病毒，所述候选经优化抗原性病原体多肽是候选经优化抗原性病毒多肽，并且所述病原体肽是病毒多肽。

8.根据权利要求7所述的方法，其中所述多肽文库是包含多个不同病毒假型的病毒假型文库，每个不同病毒假型包含不同候选经优化病毒多肽。

9.根据权利要求8所述的方法，其中在步骤(ii)中，通过对所述病毒假型被一种或更多种所述抗原结合分子之结合和/或中和的筛选来对所述候选经优化抗原性病毒多肽被一种或更多种所述抗原结合分子的结合进行筛选。

10.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中通过流式细胞术测定来对所述候选经优化抗原性病原体多肽被所述一种或更多种抗原结合分子的结合进行筛选。

11.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其还包括产生所述多肽文库。

12.根据权利要求11所述的方法，其中通过从包含多个不同核酸的核酸文库中表达所述不同候选经优化抗原性病原体多肽来产生所述多肽文库，每个不同核酸包含编码所述多肽文库中的不同候选经优化抗原性病原体多肽的核苷酸序列。

13.根据权利要求12所述的方法，其中所述不同候选经优化病原体多肽被表达在哺乳动物细胞内或表面上。

14.根据权利要求12或13所述的方法，其中所述核酸文库中的每个不同核酸的核苷酸序列是针对在哺乳动物细胞中表达所编码多肽而经密码子优化的，任选地经基因优化的。