[发明专利]CRISPR-Cas12a酶和系统

权利要求书

1.一种蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。

2.权利要求1所述的蛋白，其中，所述蛋白是CRISPR/Cas系统中的效应蛋白。

3.权利要求1所述的蛋白，其中，所述蛋白来源于Smithella sp.M82。

4.一种缀合物，其包含权利要求1-3任一项所述的蛋白以及修饰部分。

5.权利要求4所述的缀合物，其中，所述修饰部分选自另外的蛋白或多肽、可检测的标记，及其任意组合。

6.权利要求4所述的缀合物，其中，所述修饰部分通过接头连接至所述蛋白的N端或C端。

7.权利要求5所述的缀合物，其中，所述另外的蛋白或多肽选自表位标签、报告基因序列、核定位信号(NLS)序列、靶向部分、转录激活结构域、转录抑制结构域、核酸酶结构域，具有选自下列的活性的结构域：核苷酸脱氨酶、甲基化酶活性,去甲基化酶,转录激活活性,转录抑制活性,转录释放因子活性,组蛋白修饰活性,核酸酶活性,单链RNA切割活性,双链RNA切割活性,单链DNA切割活性,双链DNA切割活性和核酸结合活性；以及其任意组合。

8.权利要求7所述的缀合物，其中，所述转录激活结构域为VP64，所述转录抑制结构域为KRAB结构域或SID结构域，和/或，所述核酸酶结构域为Fok1。

9.权利要求4所述的缀合物，其中，所述缀合物包含表位标签。

10.权利要求4所述的缀合物，其中，所述缀合物包含NLS序列。

11.权利要求10所述的缀合物，其中，所述NLS序列如SEQ ID NO:7所示。

12.权利要求10所述的缀合物，其中，所述NLS序列位于所述蛋白的N端或C端。

13.一种融合蛋白，其包含权利要求1-3任一项所述的蛋白以及另外的蛋白或多肽。

14.权利要求13所述的融合蛋白，其中，所述另外的蛋白或多肽通过接头连接至所述蛋白的N端或C端。

15.权利要求13所述的融合蛋白，其中，所述另外的蛋白或多肽选自表位标签、报告基因序列、核定位信号(NLS)序列、靶向部分、转录激活结构域、转录抑制结构域、核酸酶结构域，具有选自下列的活性的结构域：核苷酸脱氨酶、甲基化酶活性,去甲基化酶,转录激活活性,转录抑制活性,转录释放因子活性,组蛋白修饰活性,核酸酶活性,单链RNA切割活性,双链RNA切割活性,单链DNA切割活性,双链DNA切割活性和核酸结合活性；以及其任意组合。

16.权利要求15所述的融合蛋白，其中，所述转录激活结构域为VP64，所述转录抑制结构域为KRAB结构域或SID结构域，和/或，所述核酸酶结构域为Fok1。

17.权利要求13所述的融合蛋白，其中，所述融合蛋白包含表位标签。

18.权利要求13所述的融合蛋白，其中，所述融合蛋白包含NLS序列。

19.权利要求18所述的融合蛋白，其中，所述NLS序列如SEQ ID NO:7所示。

20.权利要求18所述的融合蛋白，其中，所述NLS序列位于所述蛋白的N端或C端。