[发明专利]具有新氧化还原酶基序的免疫原性肽

说明书

本发明涉及包含T细胞表位和活性提高的氧化还原酶基序的免疫原性肽，及其在对象中调节免疫应答的用途。

背景技术

已经描述了数种策略来防止产生针对抗原的不期望的免疫应答。WO2008/017517描述了使用包含氧化还原酶基序和给定抗原蛋白质的MHC II类抗原的肽的新策略。这些肽将CD4+T细胞转化为具有溶细胞特性的细胞类型，称为溶细胞性CD4+T细胞。这些细胞能够通过触发凋亡来杀伤呈递该肽所源自的抗原的那些抗原提呈细胞(antigen presentingcell，APC)。WO2008/017517表明了用于变态反应和自身免疫病(例如I型糖尿病)的这一概念。在此，胰岛素可用作自身抗原。

WO2009101207和Carlier et al.(2012)Plos one 7,10e45366更详细地进一步描述了抗原特异性溶细胞性细胞。

WO2009101206描述了具有氧化还原酶基序和可溶性同种抗原的MCH II类表位的肽在用于替代治疗中时防止针对这样的抗原的免疫应答(例如，在糖尿病患者中针对注射的胰岛素的不期望的免疫应答)的用途。

WO2016059236还公开了其中在氧化还原酶基序的附近存在另外的组氨酸的经修饰肽。

在设计针对I型糖尿病的肽时，可考虑许多因素，例如自身抗原的类型(胰岛素、GAD 65、…)、自身抗原的特定结构域和表位、氧化还原酶基序、氧化还原酶基序与表位序列之间的长度和氨基酸酸序列。

除包含变应原或抗原的MHC II类表位的肽之外，WO2012069568A2还公开了使用NKT细胞表位、结合CD1d受体以及导致已显示以抗原特异性方式消除呈递所述特异性抗原的APC的溶细胞性抗原特异性NKT细胞活化的可能性。

两种策略均建立于[CST]X2C或CX2[CST]类型的氧化还原酶基序的使用。为了提高使用这样的免疫原性肽进行治疗的效力，继续寻求更多的活性肽和/或更强效的氧化还原酶基序。

发明内容

本发明提供了包含氧化还原酶基序和抗原的T细胞表位的新免疫原性肽。在进行了广泛的实验之后，本发明人已鉴定了与常规使用的CXX[CST]或[CST]XXC氧化还原酶基序相比具有不同活性的新类型的氧化还原酶基序。当将这些与在所述新基序之前、内部或之后的(另外的)碱性(带电荷)氨基酸残基组合时，氧化还原酶活性提高。通过这样做，本发明人发现，在许多情况下，当使用所要求保护的新基序和/或碱性氨基酸的特定组合时，氧化还原酶活性改变。这意味着在基序中某些碱性氨基酸的选择不是随意的，而是导致了基序作用提高。更特别地，本发明人已经表明，碱性氨基酸K(赖氨酸)或R(精氨酸)的使用优于H(组氨酸)的使用。在一些特定位置，K和R残基还彼此优于，并且基序中多个碱性氨基酸残基的组合显示进一步提高了这些作用。这些作用示于附图中，并在实施例部分中进行了解释。还测试了在模型系统中在细胞水平的作用，并确定了本发明的免疫原性肽的活性提高。

本发明涉及以下方面：

方面1：免疫原性肽，所述免疫原性肽包含：

a)氧化还原酶基序，

b)抗原蛋白质的T细胞表位，

c)在a)与b)之间的0至7个氨基酸的接头，

其中所述氧化还原酶基序选自包含以下的组：[CST]X_nC或CX_n[CST]，

其中X为任何氨基酸，并且