[发明专利]靶向CD137的抗体及其使用方法

权利要求书

1.对人CD137具有结合特异性的分离的抗体，其包含：分别与SEQ ID NO：1、2和3的序列具有至少90％同一性的HCDR1、HCDR2和HCDR3序列，分别与SEQ ID NO：16和18的序列具有至少90％同一性的LCDR1和LCDR3序列，以及与SEQ ID NO：17的序列具有至少85％同一性的LCDR2序列。

2.根据权利要求1所述的抗体，其包含：分别为SEQ ID NO：1、2和3的HCDR1、HCDR2和HCDR3序列，以及分别为SEQ ID NO：16、17和18的LCDR1、LCDR2和LCDR3序列。

3.根据权利要求1或2所述的抗体，其中所述抗体包含：重链可变区，其包含与选自SEQID NO：13、14和15，优选SEQ ID NO：13和15，更优选SEQ ID NO：13的氨基酸序列至少90％相同的氨基酸序列；和轻链可变区，其包含与选自SEQ ID NO：25、26和27，优选SEQ ID NO：25和27，更优选SEQ ID NO：25的氨基酸序列至少90％相同的氨基酸序列。

4.根据权利要求3所述的抗体，其包含：(a)SEQ ID NO：13的VH序列和SEQ ID NO：25的VL序列；(b)SEQ ID NO：14的VH序列和SEQ ID NO：26的VL序列；或(c)SEQ ID NO：15的VH序列和SEQ ID NO：27的VL序列。

5.前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述抗体不抑制CD137与其配体CD137L之间的相互作用，特别是如通过竞争ELISA所测定的。

6.根据前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述抗体

(i)与人CD137结合的解离常数(KD)小于50nM，特别是小于10nM，更特别是小于5nM，如通过表面等离振子共振测量的；

(ii)任选地，与食蟹猴CD137结合的KD小于50nM，特别是小于10nM，更特别是小于5nM，如通过表面等离振子共振测量的；

(iii)任选地，不结合人CD40和/或不结合人OX40，特别是如通过SPR测量的；

(iv)当为scFv形式时，所述抗体的解链温度(Tm)为至少50℃，例如至少55℃，优选至少60℃，更优选至少64℃，如通过差示扫描荧光法测定的，特别地，其中将所述抗体配制在pH6.4、150mM NaCl的50mM磷酸柠檬酸盐缓冲液中；

(v)当为scFv形式时，当本发明的抗体的起始浓度为10mg/ml时，在4℃下储存至少2周，特别是至少4周后，所述抗体的单体含量损失小于7％，例如小于6％，小于5％，小于4％，小于3％，优选小于2％，特别地，其中将所述抗体配制在pH 6.4的具有150mM NaCl的50mM柠檬酸磷酸缓冲液中；和/或

(vi)当为scFv形式时，当本发明的抗体的起始浓度为10mg/ml时，在5个连续的冻融循环后，所述抗体的单体含量损失小于5％，优选小于3％，更优选小于1％，特别地，其中将本发明的所述抗体配制在pH 6.4的具有150mM NaCl的50mM柠檬酸磷酸缓冲液中。

7.前述权利要求中任一项所述的抗体，其中所述分离的抗体选自由以下组成的组：单克隆抗体、嵌合抗体、Fab、Fv、scFv、dsFv、scAb、STAB和基于替代骨架的结合结构域包括但不限于基于锚蛋白的结构域、fynomer、avimer、anticalin、纤连蛋白和构建在抗体恒定区中的结合位点(例如F-star的Modular Antibody Technology)，优选Fv或scFv。

8.根据权利要求7所述的抗体，其中所述scFv具有选自由以下组成的组的氨基酸序列：SEQ ID NO：29、SEQ ID NO：30和SEQ ID NO：31，优选SEQ ID NO：29和SEQ ID NO：31，更优选SEQ ID NO：29。