[发明专利]用于治疗II型黏多糖贮积症的方法

权利要求书

1.一种在患有MPS II的受试者中减少、延迟和/或消除对额外治疗程序的需要、症状的发作、进展和/或严重程度的方法，所述方法包括通过施用包含第一AAV载体、第二AAV载体和第三AAV载体的组合物来治疗所述受试者，所述第一AAV载体包含编码指定为71557或47171的左ZFN的序列，所述第二AAV载体包含编码指定为71728或47898的右ZFN的序列，并且所述第三AAV载体包含编码艾杜糖醛酸2-硫酸酯酶(IDS)的序列。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述受试者中的GAG水平得以降低、稳定和/或GAG得以从所述受试者的尿液中消除。

3.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中血浆和/或白细胞中的IDS水平得以稳定和/或增加，任选地其中IDS水平保持相同或低于检测水平。

4.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中将第一AAV载体、第二AAV载体和第三AAV载体以1:1:8的固定比率施用。

5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述得以减少、延迟和/或消除的额外治疗程序包括酶替代疗法(ERT)；骨髓移植；和/或一种或多种用于骨科、心脏和/或上气道阻塞的支持性手术程序(例如腺样体扁桃体切除术、疝修补、脑室腹膜分流术、心脏瓣膜置换术、腕管松解术、脊柱减压)。

6.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中发作、进展或严重程度得以减少、延迟或消除的与MPS II相关的所述症状包括功能性能力衰退、神经病学恶化、关节僵硬、变为轮椅依赖性的、残疾进展、强迫空气正压通气需求(呼吸机需求)和/或寿命缩短。

7.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述第一AAV载体和/或所述第二AAV载体包含以下序列中的一种或多种：编码小肽(包括但不限于肽标签如FLAG或His标签序列)的序列；WPRE序列；核定位信号(NLS)编码序列；聚A信号；锌指核酸酶的一种或多种锌指蛋白中的一个或多个突变；锌指核酸酶的FokI核酸酶裂解结构域或裂解半结构域中的一个或多个突变；驱动所述ZFN表达的启动子序列(例如，肝脏特异性启动子如人α1-抗胰蛋白酶(hAAT)启动子)；一个或多个内含子序列(例如，HGG-IGG嵌合内含子，所述嵌合内含子包含来自人β-珠蛋白基因的第一内含子的5'供体位点和来自免疫球蛋白基因重链可变区的内含子的分支和3'受体位点)；和/或一个或多个增强子序列(例如，人ApoE增强子序列)。

8.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中：

所述左ZFN包含71557并且所述右ZFN包含71728；或者

所述左ZFN包含SB-A6P-ZFL2并且所述右ZFN包含SB-A6P-ZR2；或者

所述左ZFN包含47171并且所述右ZFN包含47898；或者

所述左ZFN包含SB-A6P-ZLEFT并且所述右ZFN包含SB-A6P-ZRIGHT。

9.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述IDS供体包含任选地如SEQ IDNO:15中所示的人IDS编码序列；和/或AAV载体，所述AAV载体含有：(i)如表3中所示的序列或(ii)如SEQ ID NO:17中所示的序列。

10.根据前述权利要求中任一项所述的方法，所述方法进一步包括在治疗之前和之后测量所述受试者中血浆、肝脏、CSF中或白细胞中的IDS活性和/或水平，其中如果在治疗之后IDS活性增加(例如，增加至正常范围)，则额外治疗程序得以延迟、减少或消除。

11.根据前述权利要求中任一项所述的方法，所述方法进一步包括在治疗之前和之后测量所述受试者的尿液中的总GAG水平、包含硫酸皮肤素的GAG(DS GAG)和/或包含硫酸乙酰肝素的GAG(HS GAG)水平，其中如果在治疗之后降低GAG、DS GAG和/或HS GAG水平，则额外治疗程序得以延迟、减少或消除。