[发明专利]使用RNA分子控制植物有害生物

说明书

披露了对鞘翅目和/或半翅目昆虫有害生物具有毒性的双链RNA(dsRNA)分子。具体地，提供了能够干扰有害生物昆虫靶基因并对靶昆虫有害生物具有毒性的干扰RNA分子。此外，披露了制备和例使用干扰RNA、如在转基因植物中使用或作为杀昆虫组合物中的活性成分使用以赋予保护免受昆虫损害的方法。

相关申请的交叉引用

本申请要求2018年9月13日提交的美国临时申请序列号62/730,712的优先权，该申请的内容通过引用以其全文并入本文。

序列表

提供ASCII文本格式的序列表作为纸质副本的替代，该序列表是根据37C.F.R.§1.821提交的，名称为“81661-WO-REG-ORG-P-1_ST25.txt”，大小为21,222,639字节，于2019年8月5日生成并经EFS-Web提交。这个序列表特此通过引用以其披露内容全文并入本说明书中。

技术领域

本发明总体上涉及由其摄食活动而引起对作物植物损害的有害生物的控制，并且更具体地涉及通过包含干扰RNA分子的组合物控制鞘翅目和半翅目有害生物。本发明进一步涉及包含干扰RNA分子的组合物并且涉及使用此类组合物的方法。

背景技术

商业作物经常受到无脊椎有害生物例如昆虫的袭击。用于控制植物中的昆虫侵染的组合物通常以化学杀昆虫剂的形式存在。由此可以达到良好的昆虫控制，但这些化学品有时也会影响其他益虫。另外的问题出现在使用高杀昆虫剂的区域中，在这些区域中有害生物昆虫群体对某些杀昆虫剂已经变得有抗性。通过各种抗性管理实践已部分地缓和了这种状况，但对于可替代的有害生物控制试剂存在着越来越多的需要。

包括细菌苏云金芽孢杆菌(Bt)的杀昆虫组合物已经可商购，并且用作环境安全和可接受的生物杀昆虫剂已有三十多年历史。这些组合物的有效性归因于在细菌的生长周期的孢子形成阶段产生的杀昆虫蛋白(称为“Cry蛋白”)。Cry蛋白主要对有害生物昆虫的幼虫期具有活性，并且对成虫期没有活性。来自Bt的几种天然Cry蛋白，例如Cry1Ab、Cry1F、Cry2Aa和Cry34/Cry35，或工程化的Cry蛋白，例如经修饰的Cry3A(mCry3A)或eCry3.1Ab，也已在转基因作物中表达，例如玉米，并在商业上用于控制某些鳞翅目和鞘翅目昆虫有害生物。

随着表达Cry蛋白的转基因植物的使用增加，现在有一些报道表明某些地区的有害生物昆虫已经对某些Cry蛋白具有耐受性或抗性。因此，鉴定具有新作用方式，即不同于现有化学杀昆虫剂和Cry蛋白的替代昆虫控制剂将是有益的。另外，可能对目标昆虫有害生物的多个生命阶段有毒的新的生物昆虫控制剂将是有用的。此类昆虫控制剂可以包括靶向遗传因子(例如对于靶昆虫有害生物的生长和/或存活必不可少的基因)的那些昆虫控制剂。