[发明专利]利用肽标签的蛋白质可溶性表达

权利要求书

1.在导入有编码融合蛋白的多核苷酸的表达体系中，产生来自所述多核苷酸的所述融合蛋白并蓄积所述融合蛋白而成的可溶性级分，所述融合蛋白包含目的蛋白以及与该目的蛋白连接的含有下述氨基酸序列的肽标签，

X(PY)_qPZ

P表示脯氨酸，

X表示由0～5个氨基酸组成的氨基酸序列，所述氨基酸独立选自由精氨酸(R)，甘氨酸(G)，丝氨酸(S)，赖氨酸(K)，苏氨酸(T)，亮氨酸(L)，天冬酰胺(N)，谷氨酰胺(Q)及甲硫氨酸(M)组成的组，

Y表示由1～4个氨基酸组成的氨基酸序列，所述氨基酸独立选自由R，G，K，T，L，N，Q及M组成的组，

q表示1～10的整数，

Z表示由0～10个氨基酸组成的氨基酸序列，所述氨基酸独立选自由R，G，S，K，T，L，N，Q及M组成的组，

在所述肽标签的氨基酸序列中，Q，M，L，N及T合计包含3个以上。

2.根据权利要求1所述的可溶性级分，其中，PY为选自PGQ，PGM，PGT，PGL，PQQ，PGN，PGQG，PGMG，PGTG，PGLG，PGNG，PQQQ中的1种以上。

3.根据权利要求1或2所述的可溶性级分，其中，所述肽标签的长度为10～30个氨基酸。

4.根据权利要求1～3中任一项所述的可溶性级分，其中，所述肽标签具有SEQ ID NO：7，10，12，15，17，19，21或23所示的氨基酸序列。

5.根据权利要求1～4中任一项所述的可溶性级分，其中，目的蛋白为酶。

6.根据权利要求1～5中任一项所述的可溶性级分，其中，所述融合蛋白包含分泌信号。

7.根据权利要求1～6中任一项所述的可溶性级分，其中，所述肽标签与所述目的蛋白的C末端侧连接。

8.融合蛋白的制备方法，其中回收权利要求1～7中任一项所述的可溶性级分，提取所述融合蛋白。

9.导入有编码融合蛋白的多核苷酸并产生未变性的所述融合蛋白的表达体系，其中，所述融合蛋白包含目的蛋白以及与该目的蛋白连接的含有下述氨基酸序列的肽标签，

X(PY)_qPZ

P表示脯氨酸，

X表示由0～5个氨基酸组成的氨基酸序列，所述氨基酸独立选自由精氨酸(R)，甘氨酸(G)，丝氨酸(S)，赖氨酸(K)，苏氨酸(T)，亮氨酸(L)，天冬酰胺(N)，谷氨酰胺(Q)及甲硫氨酸(M)组成的组，

Y表示由1～4个氨基酸组成的氨基酸序列，所述氨基酸独立选自由R，G，K，T，L，N，Q及M组成的组，

q表示1～10的整数，

Z表示由0～10个氨基酸组成的氨基酸序列，所述氨基酸独立选自由R，G，S，K，T，L，N，Q及M组成的组，

在所述肽标签的氨基酸序列中，Q，M，L，N及T合计包含3个以上。

10.从权利要求9所述的表达体系产生并包含未变性的所述融合蛋白的溶液。

11.利用有酶参与的代谢体系以提高物质生产的效率的方法，其中，使用权利要求9所述的表达体系产生未变性蛋白形式的所述融合蛋白，所述融合蛋白的目的蛋白为酶，使用得到的未变性的酶融合蛋白进行底物转化反应。