[发明专利]用于改善的木糖利用或改善的葡萄糖和木糖共利用的XYLR突变体在审
| 申请号: | 201980056032.4 | 申请日: | 2019-08-29 |
| 公开(公告)号: | CN112673016A | 公开(公告)日: | 2021-04-16 |
| 发明(设计)人: | 斯蒂芬·托马斯·佩恩;斯科特·艾伦·弗吕克曼;伯纳多·莫拉·托里斯·达科斯塔;伊索尔德·卡利汉;桑卡恩纳拉亚南·文凯斯瓦拉;利兰·肯·王 | 申请(专利权)人: | 基因组股份公司 |
| 主分类号: | C07K14/21 | 分类号: | C07K14/21;C07K14/195;C12N1/21;C12N1/20;C12R1/01;C12P7/64 |
| 代理公司: | 中科专利商标代理有限责任公司 11021 | 代理人: | 高丽娜;王新华 |
| 地址: | 美国加*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 用于 改善 利用 葡萄糖 木糖共 xylr 突变体 | ||
1.一种XylR蛋白变体,其中所述XylR蛋白变体在与SEQ ID NO:1的选自以下的位置对应的位置处具有至少一个突变:SEQ ID NO:1的位置83、88、89、112、120、141、145、146、147、150、154、155、247、270、280、286、289、295、305、306、313、333、336、337、351、364、365、372、和382。
2.一种包含XylR蛋白变体的重组宿主细胞,其中所述XylR蛋白变体在与SEQ ID NO:1的选自以下的位置对应的位置处具有至少一个突变:SEQ ID NO:1的位置83、88、89、112、120、141、145、146、147、150、154、155、247、270、280、286、289、295、305、306、313、333、336、337、351、364、365、372、和382。
3.一种用于在重组宿主细胞中增加木糖利用的方法,所述方法包括在包含木糖的培养基中培养包含XylR蛋白变体的重组宿主细胞,其中所述XylR蛋白变体在与SEQ ID NO:1的选自以下的位置对应的位置处具有至少一个突变:SEQ ID NO:1的位置83、88、89、112、120、141、145、146、147、150、154、155、247、270、280、286、289、295、305、306、313、333、336、337、351、364、365、372、和382,其中当在木糖存在下培养细胞时,与表达SEQ ID NO:1的宿主细胞的木糖利用相比,XylR蛋白变体的表达赋予所述重组宿主细胞改善的木糖利用。
4.如权利要求3所述的方法,其中所述方法用于制备脂肪酸衍生物,所述方法包括在包含木糖的培养基中培养重组宿主细胞,所述重组宿主细胞还包含至少一种异源脂肪酸衍生物生物合成酶。
5.如权利要求4所述的方法,其中所述脂肪酸衍生物是:脂肪酸酯并且其中至少一种异源脂肪酸衍生物生物合成酶具有酯合酶活性,并且任选地其中至少一种异源脂肪酸衍生物生物合成酶是硫酯酶;ω-羟基脂肪酸并且其中至少一种异源脂肪酸衍生物生物合成酶具有ω-羟化酶活性(EC 1.14.15.3);脂肪醛并且其中至少一种异源脂肪酸衍生物生物合成酶具有羧酸还原酶(CAR)活性;脂肪胺并且其中至少一种异源脂肪酸衍生物生物合成酶具有羧酸还原酶(CAR)活性,并且另一种异源脂肪酸衍生物生物合成酶具有羧酸还原酶(CAR)活性、氨基转移酶或胺脱氢酶活性;或脂肪醇乙酸酯并且其中至少一种异源脂肪酸衍生物生物合成酶具有羧酸还原酶(CAR)活性,并且另一种异源脂肪酸衍生物生物合成酶具有将脂肪醇转化为脂肪醇乙酸酯的脂肪醇O-乙酰基转移酶活性。
6.如权利要求5所述的方法,其中所述方法用于制备C5-C24脂肪酸甲酯(FAME)或C5-C24脂肪酸乙酯(FAEE)或C5-C24脂肪酸甲酯(FAME)和C5-C24脂肪酸乙酯(FAEE)的组合,所述方法包括在包含木糖的培养基中培养:重组宿主细胞,所述重组宿主细胞包含至少一种具有酯合酶活性(E.C.3.1.1.67)的异源脂肪酸衍生物生物合成酶和与SEQ ID NO:1具有至少90%序列同一性的XylR蛋白变体,其中所述XylR蛋白变体在与SEQ ID NO:1的选自以下的位置对应的位置处具有至少一个突变:SEQ ID NO:1的位置83、88、89、112、120、141、145、146、147、150、154、155、247、270、280、286、289、295、305、306、313、333、336、337、351、364、365、372、和382。
7.如权利要求1-6中任一项所述的XylR蛋白变体、重组宿主细胞或方法,其中所述XylR蛋白变体与SEQ ID NO:1具有90%序列同一性。
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