[发明专利]包含变体inc编码链的核酸分子

权利要求书

1.一种核酸分子，其包含含有SEQ ID NO:15的变体inc编码链，其中：

所述变体inc编码链编码变体inc RNA；并且

所述变体inc RNA是质粒拷贝数的调控因子。

2.根据权利要求1所述的核酸分子，其中，相对于由包含SEQ ID NO:19的inc序列编码的野生型inc RNA的表达，所述变体inc RNA的表达增加了载体的拷贝数。

3.根据权利要求1所述的核酸分子，其中，所述变体inc编码链包含与SEQ ID NO:17至少90％相同的核苷酸序列。

4.根据权利要求1所述的核酸分子，其中，所述变体inc编码链包含SEQ ID NO:17。

5.一种复制子，其包含根据权利要求1至4中任一项所述的核酸分子、启动子和复制起点，其中：

所述启动子可操作地连接至所述变体inc编码链；并且

所述变体inc RNA调控所述复制子的拷贝数。

6.根据权利要求5所述的复制子，其中，所述复制子包括变体RepFIC复制子，并且所述核酸分子为所述变体RepFIC复制子的一部分。

7.一种载体，所述载体包含根据权利要求5所述的复制子。

8.根据权利要求7所述的载体，其中，所述载体包括质粒。

9.根据权利要求7所述的载体，其还包含用于制备目标产物的靶基因。

10.根据权利要求9所述的载体，其中，所述目标产物包括以下一种或多种：(i)目标RNA；(ii)目标蛋白；(iii)目标生物材料；(iv)目标聚合物、其前体和/或其生产酶；(v)目标甜味剂、其前体和/或其生产酶；(vi)目标油、其前体和/或其生产酶；(vii)目标脂肪、其前体和/或其生产酶；(viii)目标多糖、其前体和/或其生产酶；(ix)目标氨基酸、其前体和/或其生产酶；(x)目标核苷酸、其前体和/或其生产酶；(xi)目标疫苗、其前体和/或其生产酶；或(xii)目标药物产品、其前体和/或其生产酶。

11.一种重组微生物，其包含根据权利要求5至6中任一项所述的复制子。

12.一种重组微生物，其包含根据权利要求7至10中任一项所述的载体。

13.根据权利要求12所述的重组微生物，其中，所述重组微生物通过经由转化、缀合或转导中的一种或多种将所述载体引入到前体微生物中来制备。

14.根据权利要求12所述的重组微生物，其中，所述重组微生物由埃希氏菌属细菌或大肠杆菌种类细菌中的一种或多种制备。

15.一种用于调控重组微生物中根据权利要求7至10中任一项所述的载体的拷贝数的方法，所述方法包括以下步骤：

(1)将所述载体引入到前体微生物中，从而获得所述重组微生物；以及

(2)在足以使所述载体复制的条件下在培养基中培养所述重组微生物，从而调控所述载体的拷贝数。

16.一种用于制备目标产物的方法，所述方法通过在重组微生物中使用根据权利要求7至10中任一项所述的载体来进行，其中，所述载体还包含用于制备所述目标产物的靶基因，所述方法包括以下步骤：

(1)将所述载体引入到前体微生物中，从而获得所述重组微生物；

(2)在所述重组微生物表达所述靶基因的条件下在培养基中培养所述重组微生物，从而制备所述目标产物；以及

(3)从所述重组微生物和/或所述培养基回收所述目标产物。