[发明专利]IL-13/IL-4超级因子：免疫细胞靶向性构建体及其使用方法

说明书

提供了用于用包括人IL‑13超级因子和/或人IL‑4超级因子的靶向型构建体增强抗肿瘤效应免疫细胞的方法和组合物。还可以包含细胞因子或另外的共刺激序列以增强细胞的杀肿瘤作用。

相关申请的交叉引用

本申请要求于2018年6月1日提交的美国临时申请第62/679,692号以及于2018年6月19日提交的美国临时申请第62/687,225号的优先权，所述美国临时申请的公开内容出于所有目的通过引用整体并入本文。

背景技术

细胞因子是由许多细胞分泌的小型细胞信号传导分子，并且是在细胞间通讯中广泛使用的一类信号传导分子。细胞因子调节关键的细胞功能，包含分化、增殖和凋亡/抗凋亡。

许多细胞因子通过首先与相对较高亲和力的细胞因子受体链(通常被称为“a”)相互作用，然后通过与不同细胞因子之间共享的受体链(共享受体链)的相对低亲和力相互作用来介导刺激。细胞因子与第一个高亲和力受体的结合产生了复合表面，共享受体链随后可以结合所述复合表面。

白介素-4(IL-4)代表了这种细胞因子。IL-4的主要结合链是IL-4受体α(IL-4Rα)。IL-4/IL-4Rα复合物充当IL-4受体第二组分γc的配体。另外，IL-4/IL-4Rα复合物充当白介素-13(IL-13)受体α1(IL-13Rα1)的配体。与IL-4不同，IL-13不与IL-4Rα结合，但是IL-13/IL-13Rα1复合物确实与IL-4Rα结合。

因为IL-4和IL-13可以通过不同的受体发出信号，所以可以假定它们能够激活不同的信号转导通路。实际上，γc活化酪氨酸激酶Janus激酶3(JAK3)，而IL-13Rα1活化Tyk2和JAK2。活化的JAK介导IL-4R胞质尾在保守酪氨酸残基上的磷酸化，所述保守酪氨酸残基充当含有Src同源2(SH2)结构域的蛋白质的对接位点。三个紧密聚集的酪氨酸残基充当信号转导子和转录激活子6(STAT6)的对接位点，所述STAT6是选择性偶联至IL-4Rα链的转录因子。IL-13与IL-13Rα1的结合也通过IL-13/IL-13Rα1复合物与IL-4Rα的结合而活化STAT6。

除STAT6外，IL-4募集并活化IRS-2。结构功能分析表明，IL-4Rα的跨膜结构域上的酪氨酸残基[Tyr.sup.497，胰岛素/IL-4R基序(I4R)的部分]对于IL-4活化IL-4Rα后的IRS-2与IL-4Rα的对接是必要的。然后，JAK1和JAK3使结合IL-4Rα的IRS-2磷酸化。IRS-2的活化导致磷酸肌醇3激酶(PI3K)和下游蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶Akt的活化，该通路被认为可介导许多细胞类型的生长和存活信号。实际上，该通路对于表达I型IL-4R的细胞(NK细胞、T细胞和B细胞)中IL-4介导的生长很重要。

尽管普遍存在IL-4Rα，但在T细胞、自然杀伤(NK)细胞、嗜碱性粒细胞、肥大细胞和大多数小鼠B细胞中发现了γc而非IL-13Rα1(大多数人B细胞表达γc和IL-13Rα1两者)。因此，IL-4(而非IL-13)促进原初T细胞向T_H2细胞的分化，并且IL-4在诱导小鼠IgE应答方面显得比IL-13更为重要。

一些骨髓来源的细胞(包含巨噬细胞和树突状细胞)表达γc和IL-13Rα1两者，因此对IL-4和IL-13两者均产生应答。这两个受体亚基在这些细胞的不同亚群上的相对丰度的差异可能部分解释了它们对IL-4和IL-13的相对反应性。在大多数非骨髓来源的细胞(包含平滑肌和上皮细胞)中发现了IL-13Rα1，但很少或没有γc亚基；因此，在刺激这些细胞方面，与IL-13相比，IL-4没有固有的优势。