[发明专利]用于富集髓系来源的抑制细胞的试剂盒、组合物和方法

说明书

提供了用于富集髓系来源的抑制细胞(MDSC)的试剂盒、组合物和方法。在一个实施方案中，所述试剂盒包含：(a)结合一种或多种非MDSC靶细胞的一种或多种抗体或其片段；(b)多个颗粒，其中所述多个颗粒与所述一种或多种抗体中的至少一种连接或可连接。

相关申请的交叉引用

本申请要求于2018年6月6日提交的美国临时申请No.62/681,224的优先权权益，其全部内容通过引用并入本文中。

发明领域

本公开涉及用于富集目标细胞的试剂盒、组合物和方法。更具体地，本公开涉及用于富集髓系来源的抑制细胞(MDSC)的试剂盒、组合物和方法。

发明背景

造血系统负责血液中所有细胞的生成，包括构成免疫系统的红细胞、血小板和白细胞。在免疫系统细胞的功能中，这些细胞中的某些细胞可以防御病原体和其他侵害的攻击。另外，免疫系统的细胞对于监视宿主组织中已经癌变的细胞很重要。当免疫细胞不能发挥最佳功能时，可能导致诸如自身免疫疾病和癌症进展的病况。

免疫系统的细胞非常复杂，可以大致分为先天性细胞类型和适应性细胞类型。在这些分支内有多种细胞亚型，每种亚型具有其自身独特的功能，以及与不同细胞类型之间的复杂相互作用。研究人员对研究和分析免疫系统中给定细胞类型的特性和功能越来越感兴趣。

髓系来源的抑制细胞(MDSC)是炎症领域和癌症领域的研究人员特别感兴趣的。MDSC是一类血细胞，其调节癌症、慢性感染和炎症性病况以及器官移植中的免疫应答。众所周知，MDSC在健康个体中是不存在的，但是它是响应于大多数肿瘤分泌的可溶性因子而诱导产生的。在患有肿瘤负荷的受试者中，骨髓(BM)来源的MDSC积累在周围淋巴器官和肿瘤微环境中。BM来源的MDSC也可能在循环位置和转移前位置检测到。在几种人类癌症以及动物实验性肿瘤模型中，大量MDSC的存在与肿瘤的生长和转移以及总体预后不良有关。阻断MDSC活性或耗尽MDSC群体的治疗方法在治疗动物模型中的癌症已显示出疗效前景。因此，MDSC生物学是生物医学研究中一个非常活跃的领域。

将样品中存在的目标细胞与其他细胞类型有效且高效分离的细胞分离方法，对于免疫细胞研究人员而言是极为重要的工具。目前分离MDSC的方法需要通过多色流式细胞术对细胞亚群进行分选。或者，Miltenyi Biotec Inc.(MBI)制造了基于两步阳性免疫磁分离方法的小鼠MDSC分离试剂盒，以富集表达MDSC细胞群体(诸如Gr1^高Ly6G^高和Gr1^低Ly6G^阴性细胞群体)典型的细胞表面标记物的细胞。第一步，通过使用Ly6G特异性抗体(Ab)进行阳性选择，使样品细胞群体富集Ly6G^高细胞。第一步的流出液包含Gr1^低Ly6G^阴性细胞，其在第二步中使用Gr1特异性Ab和阳性免疫磁选择进行富集。MBI小鼠MDSC分离试剂盒有几个缺点，限制了其在MDSC生物学研究中的实用性。该过程不仅耗时，而且使用阳性选择会导致分离出的细胞被抗体和磁性颗粒包被，这可能会产生意想不到的后果。例如，阳性选择的MDSC可能会被激活，从而干扰其功能。此外，如果打算将阳性选择的细胞(重新)导入受体中，则它们可能会被受体的免疫系统耗尽；具体地，已知Gr1是体内的消耗性抗体。

人们需要新的试剂盒、组合物和方法以富集MDSC。

发明概述

本公开提供了试剂盒、组合物和方法，其使用结合一个或多个靶细胞的一种或多种抗体或其片段，从包含靶细胞和髓系来源的抑制细胞(MDSC)的样品中富集MDSC。本公开的试剂盒、组合物和方法的一个优点是使用单个阴性选择步骤富集MDSC。本公开的试剂盒、组合物和方法的另一个优点是以高纯度(即纯的或基本上纯的)和高回收率富集MDSC。本公开的试剂盒、组合物和方法的又一个优点是，富集的MSDC不与在富集过程中使用的任何抗体或颗粒缔合或结合。