[发明专利]多价蛋白质复合物

说明书

本公开涉及制备和使用多蛋白复合物的方法。该复合物可以为溶液中或表面上的多个靶标建立多价结合机制。该复合物具有多种应用，并可用于例如T细胞的活化和/或扩增。

技术领域

本发明内容涉及制备和使用多价蛋白复合物的方法。

背景

创建具有一个或多个靶标多个结合位点的分子通常很困难。一种方法是将许多配体用化学方法缀合到聚合物上。例如，多糖，聚(乙二醇)(PEG)，N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺(HPMA)或合成的树枝状聚合物通常用于结合蛋白的化学缀合。然而，制备这样的共轭分子通常具有高成本和低产率，并且难以大规模制造。另一种方法是将结合配体与反应性交联剂共价交联，例如，将蛋白质与戊二醛交联。这种交联通常会产生随机定向和成簇的蛋白质复合物，这些复合物通常会损害其功能。

由于多价蛋白质复合物具有多种应用，因此需要开发一种更有效的方法来产生多价蛋白质复合物。

概要

本公开内容涉及制备和使用多价蛋白复合物的方法。

本公开内容提供了包含多蛋白复合物的组合物，所述多蛋白复合物包含具有两个或更多个Fc结合结构域的多肽，以及两个或更多个各自包含Fc区的含有Fc的蛋白，其中每个含有Fc的蛋白结合至多肽中的Fc结合结构域。

在一些实施方案中，含Fc的蛋白是抗体，重链抗体，双特异性抗体或Fc融合蛋白。

在一些实施方案中，多蛋白复合物可以结合溶液或固体表面上的两个或更多个靶分子。

在一些实施方案中，Fc结合结构域是以下的lgG结合结构域：

葡萄球菌蛋白A或其任何功能变体，lgG的结合结构域

链球菌蛋白G或其任何功能变体，或天然或工程改造的Fc结合蛋白的Fc结合结构域。

在一些实施方案中，多肽中的两个或更多个Fc结合结构域通过接头序列连接。

在一些实施方案中，Fc结合结构域具有至少为

与SEQ ID NO：1、2、3、4、5、6、7、8或9具有90％的相同性。

在一些实施方案中，含Fc的蛋白是与一个或多个选自CD2，CD3，CD7，CD11a，CD19，CD26，CD27，CD28，CD30，CD30L，CD40，CD43，CD44，CD45RA，CD46，CD49d，CD62L，CD69，CD81，CD95，CD196，CD127，

CD137，CD226，BTLA，0X40，ICOS，GITR，PD1，PDL1，CTLA4，HLA-DR和KLRG-1。

在一些实施方案中，可以通过共价键或非共价相互作用将两种或更多种多蛋白复合物进一步组装成超复合物。

在一些实施方案中，多蛋白复合物中的两个或更多个含Fc的蛋白是相同的。

在一些实施方案中，含Fc的蛋白是抗CD3抗体。在一些实施方案中，含Fc的蛋白是抗CD28抗体。在一些实施方案中，含Fc的蛋白是与T细胞表面抗原(例如，CD2，CD27，CD28，CD46或CD137)特异性结合的抗体。

在一些实施方案中，组合物包含多种包含两个或更多个不同的含Fc蛋白的多蛋白复合物。

在一些实施方案中，组合物包含多种多蛋白复合物，每种多蛋白复合物包含一种或多种抗CD3抗体和一种或多种抗CD28抗体。

在本公开中还提供了用于调节细胞功能的方法。该方法包括使细胞与本文所述的组合物接触。