[发明专利]可活化白介素-2多肽及其使用方法

权利要求书

1.一种融合多肽，其具有下式：

[A]-[L1]-[B]-[L2]-[D]或[A]-[L1]-[D]-[L2]-[B]或[D]-[L2]-[B]-[L1]-[A]或

[B]-[L2]-[D]-[L1]-[A]或[D]-[L1]-[B]-[L1]-[A]或[B]-[L1]-[D]-[L1]-[A]

其中，

A为白介素2(IL-2)多肽；

B为半衰期延长元件；

L1和L2各自独立地为多肽接头，其中L1为蛋白酶可裂解的多肽接头并且L2为任选地蛋白酶可裂解的多肽接头；

D为IL-2阻断部分；并且

其中所述融合多肽具有减弱的IL-2受体活化活性，其中所述融合多肽的所述IL-2受体活化活性比含有通过裂解所述蛋白酶可裂解的接头L1而产生的所述IL-2多肽的所述多肽的所述IL-2受体活化活性小至少约10倍。

2.一种融合多肽，所述融合多肽包含以下每一种中的至少一种：

a)白介素2(IL-2)多肽[A]；

b)IL-2阻断部分[D]；和

c)蛋白酶可裂解的多肽接头[L]；并且

其中所述IL-2多肽和所述IL-2阻断部分通过所述蛋白酶可裂解的多肽接头可操作地连接，并且所述融合多肽具有减弱的细胞因子受体活化活性，其中所述融合多肽的所述细胞因子受体活化活性比含有通过裂解所述蛋白酶可裂解的接头而产生的所述细胞因子多肽的所述多肽的所述细胞因子受体活化活性小至少约10倍。

3.如权利要求1或权利要求2所述的融合多肽，其中含有所述裂解的多肽的片段的所述IL-2多肽的所述激动剂活性与所述未裂解的融合多肽相比增加至少约50倍。

4.如权利要求1至3中任一项所述的融合多肽，其中使用CTLL-2增殖测定、磷酸STATELISA或HEK Blue报告基因细胞测定来评定所述激动剂活性。

5.如权利要求1至4中任一项所述的融合多肽，其中所述未裂解的融合多肽以基本上类似于所述天然存在的IL-2的方式结合IL-2受体α(IL-2Rα)。

6.如权利要求1至5中任一项所述的融合多肽，其中所述阻断部分抑制所述未裂解的融合多肽中所述IL-2多肽对IL-2受体α/β/γ(IL-2Rαβγ)和IL-2受体β/γ(IL-2Rβγ)的活化。

7.如权利要求1至6中任一项所述的融合多肽，其中每种蛋白酶可裂解的接头多肽独立地包含能够被选自由以下组成的组的蛋白酶裂解的序列：激肽释放酶、凝血酶、糜酶、羧肽酶A、组织蛋白酶G、组织蛋白酶L、弹性蛋白酶、PR-3、颗粒酶M、钙蛋白酶、基质金属蛋白酶(MMP)、成纤维细胞活化蛋白(FAP)、ADAM金属蛋白酶、纤溶酶原活化剂、组织蛋白酶、半胱天冬酶、类胰蛋白酶和肿瘤细胞表面蛋白酶。

8.如权利要求1至7中任一项所述的融合多肽，其中每种蛋白酶可裂解的多肽独立地包含同一蛋白酶的两个或更多个裂解位点或被不同蛋白酶裂解的两个或更多个裂解位点，或者所述蛋白酶可裂解的多肽中的至少一种包含两种或更多种不同蛋白酶的裂解位点。

9.如权利要求1至8中任一项所述的融合多肽，其中所述IL-2阻断部分非共价结合至所述IL-2多肽。

10.如权利要求9所述的融合多肽，其中所述非共价结合为pH依赖性的。

11.如权利要求1至10中任一项所述的融合多肽，其中所述IL-2阻断部分包含所述IL-12的同源受体的配体结合结构域或片段、结合所述IL-12多肽的单结构域抗体、Fab或scFv、或结合所述IL-12的受体的抗体或抗体片段(例如Fab、单结构域抗体、scFv)。

12.如权利要求1至11中任一项所述的融合多肽，其中所述IL-2阻断部分也是半衰期延长元件。