[发明专利]去细胞器官及其制备方法

说明书

本发明是关于用以制备去细胞器官的方法。本发明方法包含对源自动物的器官施以静态超临界流体(SCF)处理后，再施以动态SCF处理。可选择地，本发明的方法更包含在静态SCF处理前施以高渗及低渗处理，以及/或是在动态SCF处理后施以中和处理。本发明也提供以本发明方法制备的去细胞器官。

相关申请的交叉引用

本申请要求享有2018年9月11日所提交的美国临时申请62/729,983的申请日的权益，该美国临时申请在此通过引用而并入全文。

发明背景

1.技术领域

本发明是关于用以制备去细胞器官的领域。更具体来说，本发明是关于用以制备去细胞器官的改良方法，其中该去细胞器官适合作为异体移植物(xenograft)，以治疗心脏病等不同疾病。

2.背景技术

心脏病泛指会影响心脏功能的各种疾病。常见的心脏病包含冠状动脉心脏病(coronary heart disease,CHD)、心脏瓣膜疾病(valvular heart disease)、心肌病(cardiomyopathy)、心律不齐(arrhythmias)及发炎性心脏病。世界卫生组织(WorldHealth Organization,WHO)指出，每年有超过一千七百万人死于心血管疾病。与心脏病相关的典型病症及症状包含，胸痛、呼吸困难、出汗、恶心、心跳不规律、虚弱及头晕。造成心脏病的危险因子包含吸烟、高血压、高胆固醇、糖尿病、肥胖、酒精、不良饮食，以及缺乏身体活动。

当对其他医药或手术治疗无效时，心脏移植提供了末期心脏衰竭或严重心脏病一种可行的外科移植手术。全球每年约有3,500例心脏移植手术，其中超过半数执行于美国。除了感染及败血症之外，器官排斥也为心脏移植的主要并发症之一。具体来说，源自另一个体的移植心脏通常会于受体中诱发排斥反应。为了抑制或减轻排斥反应，病患终其一生需持续使用免疫抑制药物。然而，免疫抑制药物可能会产生许多副作用，例如增加感染及/或肿瘤发生的机率。

有鉴于此，相关领域亟需一种用以制备心脏的改良方法，其可保留心脏的天然结构(structure)及构造(conformation)，并降低免疫性物质(immunogenic matter；例如，细胞及/或酶)的含量，使制备的心脏在移植后可作为支持宿主细胞生长的三维骨架，而不会引发不良的排斥反应。

发明内容

发明内容旨在提供本发明的简化摘要，以使阅读者对本发明具备基本的理解。此发明内容并非本发明的完整概述，且其用意并非在指出本发明实施例的重要/关键组件或界定本发明的范围。其唯一目的旨在在此提供以简要形式公开的一些关键概念，作为后面要介绍的更详细内容的前奏。

本发明的第一方面是关于一种用以制备去细胞器官(例如，去细胞心脏)的方法，其中该去细胞器官的特征在于保有天然的结构及构造，而不具免疫性残留物(immunogenicity residue，例如细胞物质(cellular matter))。由本发明方法制备的去细胞器官适用于进行组织移植。用以制备去细胞器官的方法包含：

(a)以一第一超临界流体(supercritical fluid,SCF)处理一器官，其中是在第一辅溶剂(co-solvent)存在下，于第一压力200-500巴及第一温度30-50℃下，处理第一时间10-100分钟；以及

(b)以一连续式(continuous flow)的第二SCF处理步骤(a)的经第一SCF处理的器官，其中是在第二辅溶剂存在下，于第二压力200-500巴及第二温度30-50℃下，处理第二时间10-100分钟，其中该第二SCF的流速是每分钟10-30升。

依据本发明实施方式，本发明方法不包含以一试剂处理该器官的步骤，其中该试剂是选自由一酶、一离子螫合剂、一清洁剂、一甘油及其组合所组成的群组。