[发明专利]用以编辑血红蛋白相关突变的同源定向修复模板设计和递送在审
| 申请号： | 201980042235.8 | 申请日： | 2019-04-24 |
| 公开（公告）号： | CN112313334A | 公开（公告）日： | 2021-02-02 |
| 发明（设计）人： | 戴维德·J·罗林斯;索姆亚·帕塔比;安德鲁·M·沙尔博格;凯尔·雅各比 | 申请（专利权）人： | 西雅图儿童医院(DBA西雅图儿童研究所) |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12N15/90;A61K48/00;C12N15/113;C12N9/22 |
| 代理公司： | 北京信慧永光知识产权代理有限责任公司 11290 | 代理人： | 王芬;张淑珍 |
| 地址： | 美国华*** | 国省代码： | 暂无信息 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用以 编辑 血红蛋白 相关 突变 同源 定向 修复 模板 设计 递送 | ||
1.一种用于编辑细胞中的HBB基因的方法，所述方法包括：
(i)向所述细胞中引入编码向导RNA(gRNA)的多核苷酸，以及
(ii)向所述细胞中引入模板多核苷酸。
2.如权利要求1所述的方法，其中，所述gRNA包含与SEQ ID NO：01-SEQ ID NO：06中任一项的核苷酸序列具有至少95％同一性的核酸。
3.如权利要求1或2所述的方法，其中，所述gRNA包含与SEQ ID NO：07-SEQ ID NO：12中任一项的核苷酸序列具有至少95％同一性的核酸。
4.如权利要求1-3中任一项所述的方法，其中，所述gRNA包含SEQ ID NO：01-SEQ IDNO：06中任一项的核苷酸序列。
5.如权利要求1-4中任一项所述的方法，其中，所述gRNA包含SEQ ID NO：01的核苷酸序列。
6.如权利要求1-5中任一项所述的方法，其中，所述gRNA包含SEQ ID NO：07的核苷酸序列。
7.如权利要求1-6中任一项所述的方法，其中，向所述细胞中引入编码gRNA的多核苷酸包括使所述细胞与包含CAS9蛋白和编码所述gRNA的多核苷酸的核糖核蛋白(RNP)接触。
8.如权利要求7所述的方法，其中，所述CAS9蛋白和编码所述gRNA的多核苷酸的比为0.1:1到1:10之间。
9.如权利要求7所述的方法，其中，所述CAS9蛋白和编码所述gRNA的多核苷酸的比为1:1到1:5之间。
10.如权利要求7所述的方法，其中，所述CAS9蛋白和编码所述gRNA的多核苷酸的比为约1:2.5。
11.如权利要求1-10中任一项所述的方法，其中，所述模板多核苷酸编码所述HBB基因的至少部分或其互补物。
12.如权利要求1-11中任一项所述的方法，其中，所述模板多核苷酸编码野生型HBB基因的至少部分或其互补物。
13.如权利要求1-12中任一项所述的方法，其中，所述HBB基因的至少部分包含所述HBB基因的外显子1。
14.如权利要求1-13中任一项所述的方法，其中，病毒载体包含所述模板多核苷酸。
15.如权利要求14所述的方法，其中，所述载体是腺相关病毒(AAV)载体。
16.如权利要求14或15所述的方法，其中，所述载体是自互补AAV(scAAV)载体。
17.如权利要求1-16中任一项所述的方法，其中，所述模板多核苷酸包含至少约4kb的HBB基因。
18.如权利要求1-17中任一项所述的方法，其中，单链供体寡核苷酸(ssODN)包含所述模板多核苷酸。
19.如权利要求18所述的方法，其中，所述ssODN包含与SEQ ID NO：64-SEQ ID NO：72中任一项的核苷酸序列具有至少95％同一性的核苷酸序列。
20.如权利要求18或19所述的方法，其中，所述ssODN包含SEQ ID NO：64-SEQ ID NO：72中任一项的核苷酸序列。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于西雅图儿童医院(DBA西雅图儿童研究所)，未经西雅图儿童医院(DBA西雅图儿童研究所)许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201980042235.8/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：具有缓冲存储器的材料混合系统
- 下一篇：塔结构的阻尼器单元
