[发明专利]烃的生产

权利要求书

1.一种脂肪酸脱羧酶，其特征在于，所述脂肪酸脱羧酶包括与SEQ ID NO:1或2具有至少40％的序列同一性的序列，并且在对应于SEQ ID NO:1的G462位具有氨基酸取代。

2.如权利要求1的脂肪酸脱羧酶，其特征在于，所述氨基酸取代选自G462V、G462F、G462I、G462L、G462A、G462Y、G462C、G462H、G462N、G462Q和G462W。

3.如前述任一项权利要求所述的脂肪酸脱羧酶，其特征在于，所述脂肪酸脱羧酶包含与SEQ ID NO:1的第425-429位残基具有共有序列的氨基酸序列，其中所述共有序列包含与SEQ ID NO:3具有至少70％的序列同一性的序列。

4.如前述任一项权利要求所述的脂肪酸脱羧酶，其特征在于，所述脂肪酸脱羧酶包含在对应于SEQ ID NO：1的398-575位残基具有活性位点的氨基酸序列，

所述活性位点与选自SEQ ID NO：4-7的一个或多个序列具有至少70％的同一性。

5.如前述任一项权利要求所述的脂肪酸脱羧酶，其特征在于，所述脂肪酸脱羧酶包含与SEQ ID NO：1或2具有至少70％序列同一性的氨基酸序列。

6.如前述任一项权利要求所述的脂肪酸脱羧酶，其特征在于，所述脂肪酸脱羧酶的底物为链长等于或小于8个碳的脂肪酸，优选链长为2-5个碳的脂肪酸。

7.如前述任一项权利要求所述的脂肪酸脱羧酶，其特征在于，所述氨基酸取代在空间上阻碍所述脂肪酸脱羧酶结合链长大于8个碳的脂肪酸。

8.如前述任一项权利要求所述的脂肪酸脱羧酶，其特征在于，与在SEQ ID NO：1的G462位无取代的脂肪酸脱羧酶相比，所述脂肪酸脱羧酶在以C_n+1脂肪酸作为底物并生成相同的C_n烷烃时可以获得更高的产量，其中n≤5。

9.如前述任一项权利要求所述的脂肪酸脱羧酶，其特征在于，所述脂肪酸脱羧酶与包含SEQ ID NO：1的野生型脂肪酸脱羧酶相比，具有更高的丁酸至丙烷的脱羧酶产率。

10.如前述任一项权利要求所述的脂肪酸脱羧酶，其特征在于，所述脂肪酸脱羧酶具有光依赖性脱羧酶活性，例如蓝光依赖性脱羧酶活性，优选所述活性依赖于波长为400-520nm的光。

11.如前述任一项权利要求所述的脂肪酸脱羧酶，其特征在于，所述脂肪酸脱羧酶还包含至少一种对应于以下位点上的氨基酸取代：SEQ ID NO：1的V453、SEQ ID NO：1的G455、SEQ ID NO：1的A457、SEQ ID NO：1的Y466或SEQ ID NO：1的T484。

12.如权利要求11所述的脂肪酸脱羧酶，其特征在于，所述脂肪酸脱羧酶包含选自以下的一个或多个氨基酸取代：V453F、V453I、V453L、V453W、G455F、G455I、G455V、G455W、G455L、A457F、A457I、A457L、A457V、Y466W、T484A、T484E、T484I和T484L。

13.一种细胞，其包含编码如前述任一项权利要求所述的脂肪酸脱羧酶的核酸。

14.如权利要求13所述的细胞，其特征在于，所述细胞为细菌细胞，优选为嗜盐单胞菌属的细胞。

15.一种方法，其包括使用脂肪酸脱羧酶催化C_n+1脂肪酸转化为C_n烷烃，其中n≤5。