[发明专利]一种用于优化抗体表达的方法

权利要求书

1.一种用于优化蛋白质表达的载体，所述载体包含编码目标蛋白质的核酸序列和编码一种或多种组分的核酸序列，所述目标蛋白质具有特异性掺入的非天然编码的氨基酸位点，其中所述一种或多种组分选自SEQ.ID.NO.:12、15或17。

2.如权利要求1所述的载体，其中所述一种或多种组分是辅助蛋白或因子或遗传元件。

3.如权利要求2所述的载体，其中所述辅助蛋白或因子是伴侣蛋白。

4.如权利要求2所述的载体，其中所述遗传元件是分配B基因座(parB)。

5.如权利要求1所述的载体，所述载体还包含抗体重链C-末端延伸变体。

6.如权利要求5所述的载体，其中所述重链C-末端延伸变体包含一个或多个氨基酸。

7.如权利要求1所述的载体，其中parB以正向转录取向位于编码所述目标蛋白质的所述核酸序列的Afe1与Not1位点之间。

8.如权利要求1所述的载体，其中parB以正向转录取向位于编码所述目标蛋白质的所述核酸序列的Afe1或Zra1位点处。

9.如权利要求1所述的载体，其中parB以逆转录取向位于编码所述目标蛋白质的所述核酸序列的Afe1或Zra1位点处。

10.如权利要求3所述的载体，其中所述伴侣蛋白是Skp或FkpA。

11.如权利要求3所述的载体，其中所述伴侣蛋白是Skp和FkpA。

12.如权利要求10或11所述的载体，所述载体还包含分配B基因座(parB)。

13.如权利要求1所述的载体，其中所述目标蛋白质选自生物治疗剂、免疫原、抗体、抗体片段或它们的变体。

14.如权利要求13所述的载体，其中所述生物治疗剂是疫苗。

15.如权利要求13所述的载体，其中所述目标蛋白质是细胞因子、趋化因子、生长因子、生长因子受体、干扰素、白细胞介素、炎症分子、致癌基因产物、肽激素、信号转导分子或类固醇激素受体。

16.如权利要求13所述的载体，其中所述目标蛋白质是HER2、CD-70、PSMA、5T4、EGFR、TROP2、CD3、IL-2、IL-3、IL-10、IL-12、IL-15、IL-21、GPC3、DLL3、ROR1、瘦蛋白、生长激素释放肽、FGF-1、FGF-19、FGF-21、FGF-23、HGH、FcR、胰岛素、IGF1、TNFR1、TRAIL、EPO以及它们的类似物、双特异性分子或片段。

17.如权利要求13所述的载体，其中所述抗体片段是Fab、Fab'、F(ab')2、Fv片段、单链抗体片段(scFv)、二硫化物稳定化的scFv(dsFv))、双抗体(Db)、BiTE(双特异性T细胞衔接子)、DART(双亲和力重靶向)或串联双抗体(TandAb)。

18.如权利要求17所述的载体，其中所述抗体片段是Fab。

19.如权利要求13所述的载体，其中所述抗体片段是抗CD3Fab。

20.一种重组细胞，所述重组细胞包含编码目标蛋白质的核酸序列和编码一种或多种组分的核酸序列，所述目标蛋白质具有特异性掺入的非天然编码的氨基酸位点，其中所述一种或多种组分选自SEQ.ID.NO.:12、15或17。