[发明专利]工程化的调节性T细胞

说明书

本发明涉及工程化的调节性T细胞(Treg)，其包含能够在髓鞘碱性蛋白(MBP)肽由主要组织相容性复合体(MHC)分子呈递时，与该肽或其变体或片段特异性结合的T细胞受体(TCR)。本发明还涉及提供工程化的Treg的方法并涉及所述工程化Treg和编码所述Treg的载体和载体套件的方法和用途。

发明领域

本发明涉及工程化的调节性T细胞(Treg)。特别地，本发明涉及包含T细胞受体(TCR)的Treg，所述T细胞受体能够与髓鞘碱性蛋白(MBP)特异性结合。本发明还涉及提供工程化Treg的方法并涉及所述工程化Treg的方法和用途。

背景技术

许多自身免疫性和炎性中枢神经系统(CNS)疾病涉及自身反应性T细胞。例如，多发性硬化(MS)，其是中枢神经系统的自身免疫性炎性脱髓鞘性疾病并且是青年当中最常见的神经系统疾病。

自身免疫性和炎性CNS疾病的现有治疗通常抑制免疫系统。例如，一种治疗包括移植骨髓连同施用细胞抑制剂和免疫抑制药物。自体造血干细胞移植可能对一些患者具有持久有益效果，但该程序需要与巨大毒性和风险相关的激进清髓预处理(myelo-ablativeconditioning)。

尽管已经批准了几种降低临床复发频率的病情改善疗法(DMT)，但按照现行治疗方案，大部分患者继续在临床上加重。DMT或干细胞移植均不能介导对于自身免疫性疾病和炎性CNS疾病的免疫病理的CNS特异性抑制。

目前，不存在有效的自身免疫性疾病和炎性CNS疾病疗法。治疗仅致力于减少其症状，通常借助于免疫系统的总体抑制。需要特异性靶向与CNS疾病的发作和进展相关的局部免疫应答的疗法。

发明概述

本发明至少部分地基于发明人确定：T细胞受体基因转移技术可以用来产生抗原特异性Tregs。已经显示，人抗原特异性Tregs可以抑制活化的T细胞。

特别地，发明人已经生产例如MBP特异性Tregs，通过将MBP-TCR基因经逆转录病毒转入纯化的Tregs和通过将MBP-TCR和叉头框P3(FOXP3)基因经逆转录病毒转入常规的CD4⁺T细胞来产生。不希望受理论约束，具有MBP特异性TCR的这些工程化的Tregs可以用于抑制例如自身免疫性疾病的疾病，其中，在中枢神经系统(CNS)内MBP特异性Tregs的局部活化可以抑制如MS和其他CNS炎性病症中所见的CNS病理。

不希望受理论约束，出乎意料的是发明人已经能够开发出抑制致病性T细胞增殖的Treg。本领域先前提出，相比常规T细胞中的TCRs，Tregs中的TCR对自身抗原具有更高亲和力(Pacholczyk和Kern，Immunology,2008.125(4)450-458，通过引用方式并入本文)。也已经被报道的是，经胰岛抗原特异性TCR转导的Tregs的有效性逊于表达病毒性抗原特异性TCR的Tregs。提出这可能归因于Treg特异性TCR要求–例如某种亲和力要求。因此，Treg组库是高度多样的并且认为与常规T细胞的组库相比，其具有不同的T细胞受体集合。发明人已经出乎意料地表明，从常规T细胞分离的MBP特异性TCR可以成功地表达于Treg细胞中并且可以产生有功能的Treg。

因此，本发明提供工程化的调节性T细胞(Treg)，其包含能够在相对于MBP 111-129(SEQ ID NO:3)或其片段包含至少90％同一性的肽被主要组织相容性复合体(MHC)分子呈递时与该肽特异性结合的T细胞受体(TCR)。

已知MBP111-129肽与DRB1*0401微弱地结合。这与例如MBP81-99相反，后者以高亲和力与HLA-DR15结合。

合适地，TCR能够在相对于MBP 111-129(SEQ ID NO:3)或其片段具有至少90％同一性的肽被主要组织相容性复合体(MHC)分子呈递时，与该肽特异性结合。

适当地，该肽可能能够被HLA-DRB1*0401分子呈递。