[发明专利]在体外将原始生殖细胞分化为原始卵泡的方法有效
| 申请号: | 201980040407.8 | 申请日: | 2019-05-29 |
| 公开(公告)号: | CN112352045B | 公开(公告)日: | 2023-10-20 |
| 发明(设计)人: | 永松刚;西村洋平;岛本走;林克彦 | 申请(专利权)人: | 国立大学法人九州大学 |
| 主分类号: | C12N5/075 | 分类号: | C12N5/075 |
| 代理公司: | 上海翼胜专利商标事务所(普通合伙) 31218 | 代理人: | 翟羽 |
| 地址: | 日本福冈*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 体外 原始 生殖细胞 化为 卵泡 方法 | ||
1.一种在体外将原始生殖细胞分化为原始卵泡的方法,其特征在于,所述方法为将原始生殖细胞以及邻接于所述原始生殖细胞的支持细胞在加压条件下或低氧气浓度下培养的方法。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述培养是在加压条件下以及低氧气浓度下进行。
3.如权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述培养是在PI3激酶抑制剂存在下进行。
4.如权利要求3所述的方法,其特征在于,所述PI3激酶抑制剂为Y294002。
5.如权利要求1至4中任一项所述的方法,其特征在于,所述培养是在排除雌性激素或与所述雌性激素具有类似功能的因子的条件下进行。
6.如权利要求1至5中任一项所述的方法,其特征在于,所述低氧气浓度条件为,在培养环境中的氧气浓度在7%以下的条件。
7.如权利要求1至6中任一项所述的方法,其特征在于,所述低氧气浓度条件为,在培养环境中的氧气浓度在3%以上7%以下的条件。
8.如权利要求1至7中任一项所述的方法,其特征在于,所述加压条件为,23kPa以上40kPa以下的条件。
9.如权利要求1至8中任一项所述的方法,其特征在于,所述加压条件为,28kPa以上38kPa以下的条件。
10.如权利要求1至9中任一项所述的方法,其特征在于,获得的所述原始卵泡满足以下的(1)以及(2)的条件:
(1)卵母细胞受扁平状的颗粒细胞包围;
(2)在所述卵母细胞的细胞核内,局部存在具有将卵泡的成熟维持在休止期的功能的转录因子。
11.如权利要求10所述的方法,其特征在于,所述转录因子为Foxo3a。
12.如权利要求10或11所述的方法,其特征在于,获得的所述原始卵泡进一步满足以下的(3)的条件:
(3)直径为20μm以下。
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