[发明专利]PEDF衍生的短肽在肌腱愈合中的应用

说明书

本发明提供一种用于治疗肌腱损伤的方法，其包括向对其有需要的个体给予包含PEDF衍生的短肽(PEDF‑derived short peptide；PDSP)或该PDSP变体的药物组合物，该PDSP包含人色素上皮衍生因子(pigmented epithelium‑derived factor；PEDF)的残基93至106，且其中该PDSP的变体含有该PDSP的丝氨酸‑93、丙氨酸‑96、谷氨酰胺‑98、异亮氨酸‑103、异亮氨酸‑104及精氨酸106且在其他位置处含有一或多个氨基酸取代，残基位置编号基于人PEDF。

技术领域

本发明是关于PEDF衍生的肽及其在肌腱损伤后肌腱愈合中的用途。

背景技术

肌腱含有致密的结缔组织且会将肌肉力量传递至骨骼，肌腱对于控制身体移动至关重要。肌腱损伤为常见的且通常是因过度拉伸肌腱所造成。然而，由于肌腱没有血管及无细胞性，因此肌腱严重损伤后自愈能力受到限制。不同于其他类型的结缔组织，骨髓间质基质细胞(BM-MSC)调动至肌腱损伤部位有其困难性。因此，肌腱的修复是缓慢且相对困难的过程。

最近，已经进行大量努力来采用基于细胞疗法的方法以加速肌腱再生及修复。可获得成人MSC以为肌腱再生提供足够的细胞来源。然而，细胞移植需要耗时的扩增过程。此外，成本、技术及安全问题是提供患者益处的障碍。刺激肌腱干细胞/祖细胞(TSPC)增殖的生长因子可为促进肌腱修复的替代选项。最近研究已显示，在肌腱周边处携带CD146标记物的TSPC可在局部地提供结缔组织生长因子(CTGF)之后经刺激以在肌腱伤口中增殖。富含血小板血浆(PRP)注射液是用于收集血小板衍生的生长因子(PDGF)用于肌腱损伤愈合的潜力的另一示例，尽管可能由于制剂中PDGF的低浓度而效果有限。此外，生长因子治疗可容易地用于急性肌腱损伤，暂时渡过细胞疗法的等待周期。

已报导若干生长因子具有诱导TSPC增殖的能力。显示结缔组织生长因子(CTGF)增强了CD146+TSPC的克隆能力。纤维母细胞生长因子(FGF)-2会促进通过Scleraxis(Scx)及含有基因9(Sox9)表达的SRY盒标记的TSPC的生长。此外，已报导，bFGF、胰岛素类生长因子(IGF)-1及PDGF-BB的水凝胶组合可改善脂肪衍生的间叶干细胞(ASC)的存活，以帮助活体内肌腱愈合。

色素上皮衍生因子(PEDF)广泛表达于大部分身体组织中。已报导，PEDF会介导若干干细胞/祖细胞增殖。举例而言，PEDF可有效刺激神经元祖细胞及人类胚胎干细胞的增殖。最新研究进一步显示，PEDF及PEDF衍生的短肽(PDSP)可刺激角膜缘干细胞、肌肉卫星细胞及肝干细胞的增殖。这些观测表明，PDSP可为一种有潜力用于若干类型的组织损伤(包括肌腱损伤)的治疗剂。

发明内容

本发明的一方面是关于用于肌腱损伤的药物组合物或方法。根据本发明的一个实施方式的方法包括向对其有需要的个体给予包含PEDF衍生的短肽(PDSP)或该PDSP的变体的药物组合物，其中，该PDSP包含人类色素上皮衍生在因子(PEDF)的残基93-106，且其中该PDSP的该变体含有该PDSP的丝氨酸-93、丙氨酸-96、谷氨酰胺-98、异亮氨酸-103、异亮氨酸-104及精氨酸106且在其他位置处含有一或多个氨基酸取代，其中，残基位置编号基于人PEDF。PDSP包含SEQ ID NO:1至75中的任一者所示序列。

本发明的其他方面将通过以下详细描述及所附权利要求变得显而易见。

附图说明

图1展示29聚体变体对核干细胞因子(nucleostemine)阳性的TSPC增殖的影响。在75T细胞培养烧瓶中将原代兔TSPC培养至接近汇合，且接着通过免疫染色TSPC标记物(核干细胞因子)(98％；绿色)进行验证。细胞核经Hoechst 33258(蓝色)染色，且通过落射荧光显微法目测。核干细胞因子阳性TSPC用10μM 29聚体或其变体处理24h。用细胞增殖检测试剂盒(BioVision；目录号：K307)检测24-h扩增后的TSPC数。将用PDSP溶剂处理的TSPC设定为100％。结果表述为三个独立实验的平均值±SE。