[发明专利]用于心肌病的AAV心脏基因治疗

权利要求书

1.用于将两个或更多个转基因递送到对象的心脏中的重组腺相关病毒(rAAV)核酸载体，其中所述载体从5’至3’依次包含：第一腺相关病毒(AAV)反向末端重复(ITR)序列、两个或更多个转基因和可操作地连接至所述两个或更多个转基因的启动子、多腺苷酸化信号、以及第二AAV反向末端重复(ITR)序列，其中所述两个或更多个转基因包含S100家族蛋白和凋亡抑制因子。

2.权利要求1所述的rAAV载体，其中所述S100家族蛋白是心脏S100钙结合蛋白A1(cS100A1)或其变体。

3.权利要求1或2所述的rAAV载体，其中所述凋亡抑制因子是心脏胱天蛋白酶募集域凋亡抑制因子(cARC)或其变体。

4.权利要求2或3所述的rAAV载体，其中在cS100A1转基因和cARC转基因之间存在内部核糖体进入位点(IRES)。

5.权利要求1至4中任一项所述的rAAV载体，其中所述转基因是物种特异性的。

6.权利要求1至5中任一项所述的rAAV载体，其中所述启动子是心脏限制性启动子。

7.权利要求6所述的rAAV载体，其中所述心脏限制性启动子选自以下基因：α-肌球蛋白重链基因、6-肌球蛋白重链基因、肌球蛋白轻链2v基因、肌球蛋白轻链2a基因、CARP基因、心脏α-肌动蛋白基因、心脏m2毒蕈碱型乙酰胆碱基因、ANF、心脏肌钙蛋白C、心脏肌钙蛋白I、心脏肌钙蛋白T(cTnT)、心脏肌质网Ca-ATP酶基因和骨骼α-肌动蛋白；以及来源于MLC-2v基因的人工心脏启动子。

8.权利要求6或7所述的rAAV载体，其中所述心脏限制性启动子是cTnT。

9.rAAV颗粒，其包含被衣壳化在AAV衣壳中的权利要求1至8中任一项所述的rAAV载体。

10.权利要求9所述的rAAV颗粒，其中所述AAV衣壳包含来源于AAV1、AAV2、AAV3、AAV6、AAV8或AAV9血清型的衣壳蛋白。

11.权利要求9所述的rAAV颗粒，其中所述AAV衣壳包含来源于AAVrh.10血清型的衣壳蛋白。

12.组合物，其包含权利要求9至11中任一项所述的rAAV颗粒。

13.治疗患有心脏病的对象的方法，其包括向所述对象施用权利要求12所述的组合物或权利要求9至11中任一项所述的rAAV颗粒。

14.权利要求13所述的方法，其中所述心脏病在所述对象中引起心力衰竭。

15.权利要求13或14所述的方法，其中所述心脏病是心肌病。

16.权利要求13至15中任一项所述的方法，其中所述心脏病是肥厚型心肌病或扩张型心肌病。

17.权利要求13或14所述的方法，其中所述心脏病是急性缺血。

18.权利要求13至17中任一项所述的方法，其中所述组合物通过注射到所述对象的心脏中来施用。

19.权利要求13至18中任一项所述的方法，其中所述组合物的所述施用导致所述两个或更多个转基因在所述对象的心脏中表达。

20.权利要求13至19中任一项所述的方法，其中所述对象是哺乳动物。

21.权利要求20所述的方法，其中所述哺乳动物是人。