[发明专利]用于改善的功能性和可制造性的通用或归一化抗体框架

权利要求书

1.一种制备通用或归一化兔抗体的方法，其包括：

(a)选择野生型兔抗体；

(b)将所述野生型抗体序列与归一化抗体序列进行比较，所述归一化抗体序列在可变框架和/或结合区中包含一组氨基酸残基，所述一组氨基酸残基最常出现在已知是热稳定的和/或具有至少12个月的长期稳定性的兔抗体中的相同位置处；并且鉴定与归一化序列不同的所述野生型抗体中的一个或多个氨基酸残基；以及

(c)将在步骤(b)中鉴定的所述野生型抗体的所述一个或多个氨基酸残基突变为所述归一化序列的相应氨基酸残基，以得到通用或归一化兔抗体，

其中当与未修饰的野生型抗体的结合亲和力相比时，所述抗体与其靶标的结合亲和力保持在可接受范围内。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述通用或归一化兔抗体在VH链中包含根据SEQID NO:1、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ IDNO:9或SEQ ID NO:10的氨基酸序列。

3.根据权利要求1所述的方法，其中所述通用或归一化兔抗体在Vk链中包含根据SEQID NO:2、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16或SEQID NO:17的氨基酸序列。

4.根据权利要求1所述的方法，其中所述通用或归一化兔抗体包含：

(a)根据SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ IDNO:8、SEQ ID NO:9或SEQ ID NO:10的氨基酸序列；以及

(b)根据SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:17的氨基酸序列。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中与所述野生型兔抗体相比，所述通用或归一化兔抗体表现出改善的热稳定性。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其中与所述野生型兔抗体相比，所述通用或归一化兔抗体表现出改善的长期稳定性。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，其中与所述野生型兔抗体相比，所述通用或归一化兔抗体表现出改善的脱氨基作用。

8.根据权利要求1-7中任一项所述的方法，其中与所述野生型兔抗体相比，所述通用或归一化兔抗体表现出改善的表达。

9.根据权利要求1-8中任一项所述的方法，其中所述通用或归一化兔抗体为一级兔抗体。

10.根据权利要求1所述的方法，其中所述突变在所述κ链的J1区中。

11.根据权利要求1所述的方法，其中所述突变在所述κ链的FR4区中。

12.根据权利要求1所述的方法，其中所述突变在所述重链的J2、J4和/或J6区中。

13.根据权利要求1所述的方法，其中当与所述未修饰的野生型抗体的结合亲和力相比时，所述抗体与其靶标的结合亲和力保持在可接受范围内。

14.根据权利要求1所述的方法，其中所述突变在互补决定区中。

15.一种通用或归一化兔抗体，其通过根据权利要求1-14中任一项所述的方法获得。