[发明专利]抗ROR1抗体及其用途

说明书

本发明公开了特异性识别人和小鼠ROR1的抗ROR1抗体。单克隆抗体可以通过抑制肿瘤有效地用于癌症靶向治疗以及癌症治疗剂，所述癌症靶向治疗包括通过特异性结合检测表达ROR1的各种癌症以及递送药物到特定癌症等。

发明背景

技术领域

提供了抗ROR1抗体或其抗原结合片段及其用途。

背景技术

ROR(受体酪氨酸激酶样孤儿受体)是RTK(受体酪氨酸激酶)家族的跨膜蛋白，存在ROR1和ROR2。ROR1和ROR2具有58％的氨基酸序列同一性，两种蛋白质的理论分子量约为104kDa，但由于许多N-糖基化位点，ROR1的分子量约为103kDa。ROR家族的胞外结构域由Ig、半胱氨酸富集和三环状(kringle)结构域组成，而胞内结构域由酪氨酸激酶、Ser/Thr富集和脯氨酸富集结构域组成(Borcherding等人,2014,蛋白质与细胞(Protein Cell),5:496；Rebagay等人,2012,肿瘤学前沿(Prontiers in oncology),2:1)。在生物学特性的方面，ROR2的配体是Wnt5a，但是尚未发现ROR1的配体。另外，假设ROR2具有激酶活性，但是另一方面，ROR1是假激酶。已知ROR1本身的磷酸化与Met的活性密切相关(Gentile等人,2014.IntJ Cancer 15:2305)。

ROR1在胚胎和胎儿发育过程中表达，并控制细胞极性，细胞迁移和神经突生长等。表达根据发育过程而逐渐降低，并且在成年人中几乎不表达，在B细胞发育过程中暂时表达，在脂肪细胞中报告只有很少的表达(Hudecek等人,2010,血液(Blood)116:4532,Matsuda等人,2001,Mech.Dev.105:153)。

然而，由于在各种癌细胞中观察到ROR1过表达，因此将其归类为癌胚基因。特别地，因为发现ROR1在慢性淋巴细胞性白血病(CLL)中过表达，ROR1已作为抗癌抗体靶标而受到关注(Klein等人,2001,J.Exp.Med194:1625，Rosenwald等人,2001,J.Exp.Med 194:1639)。据报道ROR1不仅在除慢性淋巴细胞性白血病(CLL)之外的血液系统恶性肿瘤诸如B细胞白血病、淋巴瘤、急性髓细胞性白血病(AML)、伯基特淋巴瘤、套细胞淋巴瘤(MCL)、急性成淋巴细胞性白血病(ALL)、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、滤泡性淋巴瘤(FL)和边缘区淋巴瘤(MZL)等中过表达，而且在包括乳腺癌、肾癌、卵巢癌、胃癌、肝癌、肺癌、结直肠癌、胰腺癌、皮肤癌、膀胱癌、睾丸癌、子宫癌、前列腺癌、非小细胞肺癌(NSCLC)、神经母细胞瘤、脑癌、结肠癌、鳞状细胞癌、黑素瘤、骨髓瘤、宫颈癌、甲状腺癌、头颈部癌和肾上腺癌等的实体癌中过表达。已知ROR1在这样的癌症中的表达与癌症患者的预后不良有关并且影响癌症转移。已经显示，当将ROR1表达被抑制的癌细胞注射到小鼠中时，存活时间增加并且转移程度也降低(Zhang等人,2012Am J Pathol.181:1903,Zhang等人,2015,PLoS ONE 7:e31127,Cui等人,2013,Cancer Res.73:3649,Baskar等人,2013,mAbs 4:349,Yamaguchi等人,2012,癌细胞(Cancer Cell)21:348,Aghebati等人,2017,生物医学与药物治疗(Biomedicine Et Pharmacotherapy),Balakrishnan,A.等人,2016,临床癌症研究(Clinical Cancer Research),Li等人,2017,自然细胞生物学(Nature Cell Biology),Bicocca等人,2012,癌细胞22:656,Daneshmanesh等人,2008,Int.J.Cancer 123:1190,Dave等人,2012,Plos One 7:e52655,Fukuda等人,Proc.Natl.Acad.Sci.105:3047)。

ROR1的这样的癌细胞特异性表达显示ROR1可以是有效的癌症靶标，因此需要开发特异性识别ROR1的抗体。