[发明专利]用于荧光显微镜的光盘显微术

权利要求书

1.一种使用荧光显微术对样本进行成像的方法，所述方法包括：

定位所述样本，使得所述样本的受关注平面与显微镜的检测物镜的焦平面共面；

将抛物面镜定位在所述样本周围，使得所述抛物面镜的焦点与所述检测物镜的焦平面和所述样本的受关注平面共面；

在所述抛物面镜上引导环形准直的激发光的光束，以将光盘聚焦在所述样本上，从而提供所述样本的360度横向照明；以及

通过所述检测物镜对所述样本进行成像。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，引导所述环形准直的激发光的光束包括：设置所述环形准直的激发光的光束的厚度，使得由所述抛物面镜反射的每个共面光片的传播轴相对于所述检测物镜的焦平面成倾斜角。

3.根据权利要求2所述的方法，其中，设置所述环形准直的激发光的光束的厚度包括：增大所述环形准直的激发光的光束的厚度，以增大每个共面光片的会聚角，或者减小所述环形准直的激发光的光束的厚度，以减小每个共面光片的会聚角。

4.根据权利要求2所述的方法，其中，所述检测物镜具有大于或等于1.4的数值孔径，其中，所述样本被安装在玻璃盖玻片上，并且其中，设置所述环形准直的激发光的光束的厚度包括：设置所述环形准直的激发光的光束的厚度，使得所述激发光在其到达所述样本之前不与所述玻璃盖玻片相交。

5.根据权利要求1所述的方法，其中，引导所述环形准直的激发光的光束包括：将准直的激发光束引导到位于所述准直的激发光束的中心处的圆锥形内镜上，使得激发光在围绕所述圆锥形内镜的每个角度被对称反射。

6.根据权利要求5所述的方法，其中，引导所述环形准直的激发光的光束包括：将圆锥形外镜定位成以所述圆锥形内镜为中心，使得从所述圆锥形内镜对称反射的激发光被所述圆锥形外镜反射成所述环形准直的激发光的光束。

7.根据权利要求6所述的方法，其中，所述圆锥形外镜是反射材料的空心圆锥体，并且其中，所述圆锥形外镜的半角与所述圆锥形内镜的半角互补。

8.根据权利要求1所述的方法，其中，定位所述抛物面镜包括：将所述抛物面镜安装成平行或反平行于所述检测物镜。

9.根据权利要求1所述的方法，其中，对所述样本进行成像包括：使用标准直立或倒置的研究级显微镜内的预先存在的光路径，通过眼睛或相机来观察所述样本。

10.根据权利要求1所述的方法，其中，对所述样本进行成像包括执行活细胞荧光成像。

11.一种用于使用荧光显微术对样本进行成像的系统，所述系统包括：

显微镜的检测物镜和样本，被定位为使得所述样本的受关注平面与所述检测物镜的焦平面共面；

抛物面镜，被定向在所述样本周围，使得所述抛物面镜的焦点与所述检测物镜的焦平面和所述样本的受关注平面共面；以及

照明系统，被配置用于在所述抛物面镜上引导环形准直的激发光的光束以将光盘聚焦在所述样本上，以及用于通过所述检测物镜对所述样本进行成像。

12.根据权利要求11所述的系统，其中，引导所述环形准直的激发光的光束包括：设置所述环形准直的激发光的光束的厚度，使得由所述抛物面镜反射的每个共面光片的传播轴相对于所述检测物镜的焦平面成倾斜角。

13.根据权利要求12所述的系统，其中，设置所述环形准直的激发光的光束的厚度包括：增大所述环形准直的激发光的光束的厚度，以增大每个共面光片的会聚角，或者减小所述环形准直的激发光的光束的厚度，以减小每个共面光片的会聚角。