[发明专利]传感器系统在审
| 申请号: | 201980026017.5 | 申请日: | 2019-02-15 |
| 公开(公告)号: | CN112088212A | 公开(公告)日: | 2020-12-15 |
| 发明(设计)人: | M·R·邓恩;K·J·阿多尔夫森;N·D·泰勒;J·E·斯波纳莫尔;J·H·科尼茨卡;C·D·艾伦;翁林栋 | 申请(专利权)人: | 埃内沃夫公司 |
| 主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12Q1/6897;C12Q1/02;G01N21/64;B01F3/08;C12R1/19 |
| 代理公司: | 隆天知识产权代理有限公司 72003 | 代理人: | 石海霞 |
| 地址: | 美国马*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 传感器 系统 | ||
1.一种用于产生工程化生产者细胞的群体的方法,包括:
将来自基因变异的生产者细胞池的每个生产者细胞包覆在液滴中,以形成包覆工程化生产者细胞的多个液滴;
对液滴进行测定以得到靶分子的水平,其中,基于工程化蛋白质的传感器通过报道分子的激活或抑制提供由生产者细胞产生的期望的靶分子的水平的读数;
分离出具有产生靶分子的期望水平的生产者细胞的液滴;以及
恢复产生靶分子的期望水平的细胞以形成生产者细胞的群体,其中,所述生产者细胞的群体是产生靶分子的期望水平的富集群体。
2.根据权利要求1所述的方法,其中,所述恢复包括:
(a)使液滴破裂,
(b)分选基因变异的生产者细胞,以及
(c)使生产者细胞在生长培养基上生长。
3.根据权利要求2所述的方法,其中,通过荧光激活的液滴分选FADS或荧光激活的细胞分选FACS进行所述分选。
4.根据权利要求2或3所述的方法,其中,所述恢复包括:
(a)分选液滴,
(b)分选基因变异的生产者细胞,以及
(c)使生产者细胞在生长培养基上生长。
5.根据权利要求4所述的方法,其中,通过荧光激活的液滴分选FADS或荧光激活的细胞分选FACS进行所述分选。
6.根据权利要求2-5中任一项所述的方法,其中,使液滴破裂包括:使包覆产生靶分子的期望水平的分离的工程化生产者细胞的液滴破裂,以形成工程化生产者细胞的群体,其中,所述工程化生产者细胞的群体是产生靶分子的期望水平的工程化生产者细胞的富集群体。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法,其中,对基于工程化蛋白质的传感器进行编码的DNA被游离地编码。
8.根据权利要求7所述的方法,其中,对基于工程化蛋白质的传感器进行编码的DNA被编码在质粒上。
9.根据权利要求1-6中任一项所述的方法,其中,对基于工程化蛋白质的传感器进行编码的DNA被整合在生产者细胞的基因组中。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法,其中,基于工程化蛋白质的传感器被或已经被转染、转导、转化或以其他方式使其在生产者细胞内可用。
11.根据权利要求1-10中任一项所述的方法,其中,所述报道分子是对可检测标记进行编码的基因,所述可检测标记在转换中被基于传感器的蛋白质激活。
12.根据权利要求11所述的方法,其中,所述可检测标记是酶或可选择标记。
13.根据权利要求12所述的方法,其中,所述酶选自lacZ、荧光素酶或碱性磷酸酶。
14.根据权利要求12所述的方法,其中,所述可选择标记是营养缺陷体、抗生素、抗性标记、毒素或可光谱检测的基因产物。
15.根据权利要求12所述的方法,其中,所述可选择标记是荧光蛋白。
16.根据权利要求14所述的方法,其中,所述可光谱检测的基因产物通过光谱学或光谱法来检测。
17.根据权利要求11所述的方法,其中,对所述报道分子进行编码的基因被游离地编码。
18.根据权利要求17所述的方法,其中,对所述报道分子进行编码的基因被游离地编码在质粒上。
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