[发明专利]靶向肿瘤微环境的嵌合抗原受体

权利要求书

1.一种免疫细胞，所述免疫细胞经工程化以表达：

(a)包含细胞外结构域的嵌合抗原受体(CAR)多肽，所述细胞外结构域包括结合第一抗原的第一抗原结合结构域和结合第二抗原的第二抗原结合结构域；以及

(b)双特异性T细胞接合器(BiTE)，其中所述BiTE结合靶抗原和T细胞抗原。

2.根据权利要求1所述的免疫细胞，其中所述CAR多肽包含跨膜结构域和细胞内信号传导结构域。

3.根据权利要求1所述的免疫细胞，其中所述CAR多肽进一步包含一个或多个共刺激结构域。

4.根据权利要求1所述的免疫细胞，其中所述第一和第二抗原是胶质母细胞瘤抗原。

5.根据权利要求1所述的免疫细胞，其中所述第一和第二抗原独立地选自表皮生长因子受体(EGFR)、表皮生长因子受体变体III(EGFRvIII)、CD19、CD79b、CD37、前列腺特异性膜抗原(PSMA)、前列腺干细胞抗原(PSCA)、白介素-13受体α2(IL-13Rα2)、肝配蛋白A型受体1(EphA1)、人表皮生长因子受体2(HER2)、间皮素、细胞表面相关粘蛋白1(MUC1)或细胞表面相关粘蛋白16(MUC16)。

6.根据权利要求1所述的免疫细胞，其中所述第一抗原结合结构域和/或所述第二抗原结合结构域包括抗体的抗原结合片段。

7.根据权利要求6所述的免疫细胞，其中所述抗体的抗原结合片段包括单结构域抗体或单链可变片段(scFv)。

8.根据权利要求1所述的免疫细胞，其中所述第一抗原结合结构域和/或所述第二抗原结合结构域包括所述第一和/或第二抗原的配体。

9.根据权利要求1所述的免疫细胞，其中所述细胞外结构域在所述第一抗原结合结构域与所述第二抗原结合结构域之间不包含接头。

10.根据权利要求1所述的免疫细胞，其中所述第一抗原结合结构域通过接头连接至所述第二抗原结合结构域。

11.根据权利要求10所述的免疫细胞，其中所述接头包含与SEQ ID NO:102、107、108、109或110的接头具有至少90％序列同一性的氨基酸。

12.根据权利要求2所述的免疫细胞，其中所述跨膜结构域包括铰链/跨膜结构域。

13.根据权利要求12所述的免疫细胞，其中所述铰链/跨膜结构域包括免疫球蛋白样蛋白、CD28、CD8或4-1BB的铰链/跨膜结构域。

14.根据权利要求12所述的免疫细胞，其中所述跨膜结构域包括CD8的铰链/跨膜结构域，其任选地包含氨基酸序列SEQ ID NO:4、10、16、22、28、37、46、58、66、72、78或104，或与氨基酸序列SEQ ID NO:4、10、16、22、28、37、46、58、66、72、78或104具有至少90％序列同一性的氨基酸序列。

15.根据权利要求2所述的免疫细胞，其中所述细胞内信号传导结构域包括TCRζ、FcRγ、FcRβ、CD3γ、CD3θ、CD3ε、CD3η、CD3ζ、CD22、CD79a、CD79b或CD66d的细胞内信号传导结构域。

16.根据权利要求15所述的免疫细胞，其中所述细胞内信号传导结构域包括CD3ζ的细胞内信号传导结构域，其任选地包含氨基酸序列SEQ ID NO:6、12、18、24、30、39、48、60、68、74、80或106，或与氨基酸序列SEQ ID NO:6、12、18、24、30、39、48、60、68、74、80或106具有至少90％序列同一性的氨基酸序列。