[发明专利]产生具有改善的特性的猪的方法

说明书

提供了一种产生IGF2基因内含子3内的序列被基因编辑的猪的方法。

技术领域

本发明涉及生物工程领域。具体而言，本发明涉及一种产生具有改善的特性的猪的方法。更具体而言，本发明涉及通过对猪IGF2基因内含子3内的序列进行基因编辑以改善猪肉生产。

背景技术

猪是作为肉类来源的最重要的家畜之一。在过去的几十年里，为了支持人口的快速增长，满足顾客对优质饮食的要求，养殖专家专注于猪分子育种以加速促进瘦肉生产。先前的研究揭示了许多与身体生长、肌肉质量和脂肪沉积有关的基因，如生长激素基因(GH)(Hammer,R.E.et al.Nature 315,680-683(1985))、肌肉生长抑制基因(Myostatin)(Grobet,L.et al.Nat Genet 17,71-74(1997)；McPherron,A.C.Lee,S.J.Proc NatlAcad Sci U S A 94,12457-12461(1997))和IGF2(Jeon,J.T.et al.Nat Genet 21,157-158(1999)；Nezer,C.et al.Nat Genet 21,155-156(1999))。特定基因在家畜中的转基因表达越来越多地用于育种和生物医学应用，产生了多种期望的性状(Hammer,R.E.etal.Nature 315,680-683(1985)；Laible,G.,Wei,J.Wagner,S.Biotechnol J 10,109-120(2015))。然而，大多数转基因策略会将外源元件引入基因组，这可能导致不可预见的影响。因此，本领域需要非转基因的方法以改善猪肉的生产。

发明概述

在第一方面，本发明提供一种产生具有改善的特性的猪的方法，包括通过基因编辑修饰猪IGF2基因内含子3中的序列的步骤。

在第二方面，本发明提供了通过本发明的方法产生的具有改善的特性的猪或其后代、生殖细胞、胚胎、分离的体细胞、组织或器官，其中所述猪中IGF2基因内含子3中的序列被修饰。

在第三方面，本发明还提供衍生自通过本发明的方法产生的具有改善的特性的猪或其后代的肉类产品，其中所述猪中IGF2基因内含子3中的序列被修饰。

在第四方面，本发明提供用于通过本发明的方法产生具有改善的特性的猪的试剂盒，其至少包括靶向猪IGF2基因内含子3中的序列的基因编辑系统。

在第五方面，本发明提供通过本发明的方法所产生的猪或其后代、生殖细胞、胚胎、分离的体细胞、组织或器官的用途，例如用于猪育种或用于猪肉生产。

附图说明

图1示出猪品系的基因型分型，以及亲代中的突变等位基因和IGF2的表达。(a)中国地方品种和进口商品猪品种的基因型分型；(b)Sanger测序以确定原代修饰猪中的突变等位基因；(c)深度测序分析原代修饰猪的突变模式；(d)四只不同年龄的雄性原代修饰猪的IGF2的相对表达。误差线表示S.E.M。***，P0.001；**，P0.01；*，P0.05。