[发明专利]用于递送治疗性蛋白质的方法和组合物

权利要求书

1.一种将治疗性蛋白质递送至受试者的中枢神经系统(CNS)的方法，所述方法包括通过肝靶向递送方法向所述受试者施用编码多结构域治疗性蛋白质的核苷酸组合物，所述核苷酸组合物足以将治疗有效量的所述多结构域治疗性蛋白质提供至所述CNS中，其中所述多结构域治疗性蛋白质包含递送结构域和酶结构域。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述递送结构域是特异性结合至内化效应物的抗体或其抗原结合片段。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述治疗性蛋白质是溶酶体酶。

4.根据权利要求3所述的方法，其中所述溶酶体酶是GAA。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述核苷酸组合物是通过病毒载体施用。

6.根据权利要求5所述的方法，其中所述病毒载体是AAV载体，任选地其中所述核苷酸组合物是以至少2×10¹²个病毒基因组/公斤(vg/kg)的剂量施用。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述内化效应物在细胞的表面上表达，所述细胞选自由以下组成的组：所述CNS中的细胞、上皮细胞和跨血脑屏障的细胞。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述递送结构域结合内化效应物，所述内化效应物

(i)选自由以下组成的组：CD63、整合素α-7(ITGA7)、MHC-I、Kremen-1、Kremen-2、LRP5、LRP6、LRP8、转铁蛋白受体、LDL-受体、LDL相关蛋白质1受体、ASGR1、ASGR2、淀粉样前体蛋白样蛋白质-2(APLP2)、爱帕琳肽受体(APLNR)、髓磷脂和淋巴细胞蛋白质(MAL)、IGF2R、空泡型H+ATP酶、白喉毒素受体、叶酸受体、谷氨酸受体、谷胱甘肽受体、瘦素受体、清道夫受体A1-5(SCARA1-5)、SCARB1-3及CD36；

(ii)在若干组织类型中表达，

其任选地选自由以下组成的组：CD63、MHC-I、空泡型H+ATP酶、IGF2R、整合素α-7(ITGA7)、LRP5、LRP6、LRP8、Kremen-2、LDL-受体、LDL相关蛋白质1受体、淀粉样前体蛋白样蛋白质-2(APLP2)、爱帕琳肽受体(APLNR)、PRLR、MAL(髓磷脂和淋巴细胞蛋白质(MAL)、白喉毒素受体、HBEGF(肝素结合EGF样生长因子)、谷胱甘肽受体、谷氨酸受体、瘦素受体及叶酸受体；

任选地其中所述受试者展现选自由以下组成的组的疾病的一种或多种症状：法布里氏病、戈谢氏病、MPS I、MPS II、MPS IIIA、MPS IIIB、MPS IIID、MPS IVB、MPS VI、MPS VII、MPS IX、庞贝氏病、溶酶体酸性脂肪酶缺乏症、异染性脑白质营养不良、A型、B型和C2型尼曼-皮克二氏病、α甘露糖苷贮积症、神经氨酸酶缺乏症、唾液酸贮积症、天冬氨酰葡萄糖胺尿症、联合鞘脂激活蛋白缺乏症、非典型性戈谢氏病、法伯氏脂肪肉芽肿病、岩藻糖苷贮积症及β甘露糖苷贮积症；

(iii)优先由骨和/或软骨表达，

其任选地选自由以下组成的组：胶原蛋白X、整合素α10(ITGA10)、成纤维细胞生长因子受体3(FGFR3)、成纤维细胞生长因子受体同功异型物C(FGFR3C)、透明质酸和蛋白聚糖连接蛋白1(CRTL1)、聚集蛋白聚糖、胶原蛋白II及Kremen-1，

任选地其中所述受试者展现选自由以下组成的组的疾病的一种或多种症状：MPS I、MPS II、MPS IIIA、MPS IIIB、MPS IIID、MPS IVA、MPS IVB、MPS VI、MPS VII、MPS IX、β甘露糖苷贮积症、戈谢氏病、非典型性戈谢氏病、联合鞘脂激活蛋白缺乏症、天冬氨酰葡萄糖胺尿症、法伯氏脂肪肉芽肿病、唾液酸贮积症、神经氨酸酶缺乏症及α甘露糖苷贮积症；

(iv)优先由单核细胞、巨噬细胞或微神经胶质细胞表达，

其任选地选自由以下组成的组：清道夫受体A1-5(SCARA1-5)、SCARB1-3、CD36、MSR1(巨噬细胞清道夫受体1)、MRC1(巨噬细胞甘露糖受体1)、VSIG4(含V-set和免疫球蛋白结构域蛋白4)、CD68(巨噬唾液酸蛋白)及CSF1R(巨噬细胞集落刺激因子1受体)，

任选地其中所述受试者展现选自由以下组成的组的疾病的一种或多种症状：溶酶体酸性脂肪酶缺乏症、戈谢氏病、非典型性戈谢氏病、联合鞘脂激活蛋白缺乏症及法伯氏脂肪肉芽肿病；

(v)优先由肾细胞表达，

其任选地选自由以下组成的组：CDH16(钙粘蛋白-16)、CLDN16(紧密连接蛋白-16)、KL(Klotho)、PTH1R(甲状旁腺激素受体)、SLC22A13(溶质载体家族22成员13)、SLC5A2(钠/葡萄糖协同转运蛋白2)及UMOD(尿调节蛋白)，

任选地其中所述受试者展现一种或多种症状或被诊断患有疾病，所述疾病选自由以下组成的组：法布里氏病、奥尔波特氏综合征、多囊性肾病及血栓性血小板减少性紫癜；

(vi)优先由肝细胞表达，

任选地是ASGR1或ASGR2，

任选地其中所述受试者展现一种或多种症状或被诊断患有疾病，所述疾病选自由以下组成的组：溶酶体酸性脂肪酶缺乏症、戈谢氏病、MPS VI、MPS VII、MPS II、A型、B型和C2型尼曼-皮克二氏病、唾液酸贮积症、神经氨酸酶缺乏症、非典型性戈谢氏病、联合鞘脂激活蛋白缺乏症、法伯氏脂肪肉芽肿病；

(vii)优先由肌肉细胞表达，

其任选地选自由以下组成的组：BMPR1A(骨形态发生蛋白受体1A)、m-钙粘蛋白、CD9、MuSK(肌肉特异性激酶)、LGR4/GPR48(G蛋白偶合受体48)、胆碱能受体(烟碱)α1、CDH15(钙粘蛋白-15)、ITGA7(整合素α-7)、CACNG1(L型钙通道亚基γ-1)、CACNAlS(L型钙通道亚基α-15)、CACNG6(L型钙通道亚基γ-6)、SCN1B(钠通道亚基β-1)、CHRNA1(ACh受体亚基α)、CHRND(ACh受体亚基δ)、LRRC14B(含富亮氨酸重复序列的蛋白质14B)、肌营养不良蛋白聚糖(DAG1)及POPDC3(含大力水手结构域蛋白3)，

任选地其中所述受试者展现一种或多种症状或被诊断患有庞贝氏病；

(viii)选自由以下组成的组：ITGA7、CD9、CD63、ALPL2、MSR1、ASGR1、ASGR2或PRLR；或

(ix)是CD63。