[发明专利]治疗脊髓损伤的组合物和方法

说明书

本发明提供了治疗脊髓损伤(SCI)的方法。这些方法涉及对患有SCI的受试者施用E4ORF1+内皮细胞和神经细胞(例如神经祖细胞(NPC)、神经胶质祖细胞或神经胶质细胞)。本发明还提供了用于这些方法的组合物，例如包括E4ORF1+内皮细胞和/或神经细胞(例如NPC、神经胶质祖细胞或神经胶质细胞)的组合物。

相关申请的交叉引用

本申请要求于2018年1月22日提交的美国临时专利申请号为62/620,269的的优先权。

通过引用的方式并入

出于仅允许通过引用的方式并入的司法管辖范围的目的，本文引用的所有文件的文本通过引用的方式整体并入本文。此外，本文引用或提及的任何产品的任何制造商说明书或目录均通过引用的方式并入。通过引用的方式并入本文的文件或其中的任何教导可用于实践本发明。专利号为8,465,732，题为“表达腺病毒E4ORF1的内皮细胞及其使用方法(Endothelial cells expressing adenovirus E4ORF1 and methods of use thereof)”的美国专利中的许多教导可与本发明结合使用或使其适于与本发明使用。因此，通过引用的方式将专利号为8,465,732的美国专利的全部内容明确并入本申请。

背景技术

脊髓损伤(Spinal cord injury)(“SCI”)会导致大量的使人衰弱并可能危及生命的缺陷。例如，在颈部(脖子)水平处的SCI经常导致危及生命的呼吸缺陷，这在很大程度上可归因于控制隔膜的膈肌(主要的呼吸肌)运动回路直接受损。其他SCI的破坏性影响包括截瘫和四肢瘫痪。世界范围内每年发生超过250,000例SCI事件，因此亟需开发能够改善患病个体存活、功能和生活质量的治疗方法。

细胞疗法是目前正在探索的疗法中最具前景的治疗策略之一，其最终目标是从SCI恢复功能。一些研究探讨了将神经祖细胞(neural progenitor cell)(“NPC”)移植到受损脊髓的安全性和有效性。NPC是一种广泛研究的仍保持增殖能力的可移植、谱系限制性(神经元和神经胶质)前体细胞源。然而到目前为止，使用NPC治疗脊髓损伤的临床前研究产生了不同的结果(1)。血管生成被认为是组织修复的重要组成部分。然而，令人惊讶的是几乎很少有人在SCI的情况下成功促进血管新生(angiogenesis)/血管生成(vasculogenesis)。一些研究探讨了利用病毒载体来提供血管生长因子(如VEGF和FGF)，虽然与某些修复潜能有关(34)，但这些方法明显的局限性在于它们是非生物性的，因此营养因子输送的剂量和时间过程仍然不受调控。最近的研究报道，在脊髓损伤部位移植含有原态内皮细胞(endothelial cell)(“EC”)以及NPC的可降解聚合物植入物可以促进大鼠脊髓损伤部位稳定功能性血管的形成(Rauch等人，2009年)。然而，虽然观察到一些神经丝阳性细胞的萌芽，但并没有报导神经元和/或轴突跨越损伤部位生长/延伸的证据，也没有神经功能恢复的报导(Rauch等人，2009年)。鉴于目前的细胞治疗尝试尚缺乏成功，本领域仍然需要能够实现功能性脊髓修复的强健有效的细胞疗法。本发明解决了这一需要。

发明内容

本发明部分源于几个令人惊讶的发现，这些发现在本专利说明书的实施例部分中更加详细地描述。具体地，现在已经发现，将神经细胞与在脊髓损伤部位表达腺病毒E4ORF1序列的工程化内皮细胞(“E4ORF1+EC”)一起移植后，能够使神经发生显著和意想不到的修复，其特征是轴突穿过脊髓损伤部位生长/延伸，重要的是，从SCI相关的功能缺陷(受损的隔膜功能和呼吸)中恢复。基于这些发现以及在本专利说明书的实施例部分中描述的其他发现，本发明提供了各种用于脊髓损伤修复的新的和改进的组合物和方法。