[发明专利]用于新颖靶抗原结合模块的特异性测定法

权利要求书

1.一种用于评估能够特异性结合靶抗原的靶抗原结合模块的特异性的方法,方法包含下述步骤:

a)提供包含抗原结合域和识别域的抗原结合分子,其中抗原结合域包含靶抗原结合模块,且其中识别域包含标签；

b)使抗原结合分子与在表面上包含靶抗原的靶细胞接触,特别是其中靶细胞是癌细胞；

c)使抗原结合分子与嵌合抗原受体(CAR)表达性报告T(CAR-T)细胞接触,其中报告CAR-T细胞包含:

i.能够特异性结合包含标签的识别域的CAR,其中CAR与应答元件可操作偶联；

ii.在应答元件控制下的报告基因；和

d)通过测量报告基因的表达来测定T细胞激活以建立靶抗原结合模块的特异性。

2.权利要求1的方法,其中抗原结合分子是IgG类抗体,特别是IgG1或IgG4同种型抗体,或其片段。

3.权利要求1或2任一项的方法,其中抗原结合域是Fab片段且识别域是Fc域。

4.权利要求1或2任一项的方法,其中抗原结合域和识别域是相同的域,特别是Fab片段。

5.权利要求1至4任一项的方法,其中标签是半抗原分子。

6.权利要求1至5任一项的方法,其中半抗原分子是洋地黄毒苷(DIG)。

7.权利要求1至4任一项的方法,其中标签是多肽标签。

8.权利要求7的方法,其中多肽标签选自由myc标签,HA标签,Avi标签,FLAG标签,His标签,GCN4标签,和NE标签组成的组。

9.权利要求1至8任一项的方法,其中靶抗原是细胞表面抗原或受体。

10.权利要求1至9任一项的方法,其中靶抗原是与人主要组织相容性复合物(MHC)的分子结合的肽,其中靶抗原结合模块是T细胞受体样(TCRL)抗原结合模块。

11.一种用于生成TCB抗体的方法,其中TCB抗体包含对靶抗原特异性的第一抗原结合模块和能够特异性结合T细胞激活性受体的第二抗原结合模块,其中第一抗原结合模块是依照权利要求1至10任一项的方法选择的。

12.权利要求11的方法,其中T细胞激活性受体是CD3。

13.一种包含锚定跨膜域和包含抗原结合模块的胞外域的嵌合抗原受体(CAR),其中抗原结合模块能够特异性结合包含标签的识别域但不能够特异性结合不包含标签的识别域。

14.权利要求13的CAR,其中标签是半抗原分子。

15.权利要求14的CAR,其中半抗原分子是洋地黄毒苷(DIG)。