[发明专利]用磷酸化酶合成包含α-1,3糖苷键的葡聚糖

说明书

本文公开了至少包含水、β‑葡萄糖‑1‑磷酸(β‑G1P)、受体分子、和α‑1,3‑葡聚糖磷酸化酶的反应组合物。这些反应可以合成具有α‑1,3糖苷键的低聚糖和多糖。还公开了α‑1,3‑葡聚糖磷酸化酶及其使用方法。

本申请要求国际申请号PCT/CN 2018/077004(2018年2月23日提交)的权益，所述国际申请以其全文通过引用并入本文。

技术领域

本公开属于酶促反应的领域。例如，本公开涉及使用葡聚糖磷酸化酶生产α-1,3-葡聚糖的反应和方法。

以电子方式递交的序列表的引用

所述序列表的官方副本经由EFS-Web以ASCII格式的序列表以电子方式提交，文件名为20190221_NB41417WOPCT2_SequenceListing.txt，创建于2019年2月21日，且具有约25千字节的大小，并与本说明书同时提交。包含在所述ASCII格式的文件中的序列表是本说明书的一部分并且以其全文通过引用并入本文。

背景技术

受到在多种应用中使用多糖的期望所驱动，研究人员已经探索了可生物降解的并且可以从可再生来源的原料经济地制造的多糖。一种这样的多糖是α-1,3-葡聚糖，其是特征在于具有α-1,3-糖苷键的不溶性葡聚糖聚合物。例如，已经使用从唾液链球菌(Streptococcus salivarius)分离的葡糖基转移酶制备了这种聚合物(Simpson等人,Microbiology[微生物学]141:1451-1460,1995)。还例如，美国专利号7000000公开了由酶促生产的α-1,3-葡聚糖制备纺成纤维。还研究了多种其他葡聚糖材料以用于开发新应用或增强的应用。例如，美国专利申请公开号2015/0232819公开了几种具有混合的α-1,3和α-1,6键的不溶性葡聚糖的酶促合成。

尽管进行了此工作，仍然需要生产含有α-1,3糖苷键的葡聚糖的不必要依赖于葡聚糖蔗糖酶活性的新方法。本发明公开了使用葡聚糖磷酸化酶合成这种葡聚糖的反应和方法以解决此需要。

发明内容

在一个实施例中，本公开涉及一种反应组合物，所述反应组合物至少包含水、β-葡萄糖-1-磷酸(β-G1P)、受体分子、和合成α-1,3-葡聚糖的磷酸化酶。

在另一个实施例中，本公开涉及一种生产α-1,3-葡聚糖的方法，所述方法包括：(a)使至少水、β-葡萄糖-1-磷酸、受体分子、和合成α-1,3-葡聚糖的磷酸化酶接触，其中产生了α-1,3-葡聚糖；和(b)任选地分离步骤(a)中产生的α-1,3-葡聚糖。

序列简述

表1.核酸和蛋白质SEQ ID号的汇总

^a将此DNA编码序列进行密码子优化用于在枯草芽孢杆菌中表达，并且仅公开为合适编码序列的实例。

具体实施方式

所有引用的专利和非专利文献的公开内容通过引用以其全文并入本文。

除非另外公开，否则如本文所使用的术语“一个/一种”旨在涵盖一个/一种或多个/多种(即，至少一个/一种)所引用的特征。

如果存在，所有范围是包含性的和可组合的，除非另有说明。例如，当列举“1至5”(即，1-5)的范围时，所列举的范围应当解释为包括范围“1至4”、“1至3”、“1-2”、“1-2和4-5”、“1-3和5”等。