[发明专利]细胞聚集体、细胞聚集体的混合物和它们的制造方法

权利要求书

1.一种细胞聚集体，其包含FOXA2阳性或TUJ1阳性的神经系统细胞，且

包含1000个以上的细胞。

2.根据权利要求1所述的细胞聚集体，其包含总细胞数的约70％以上的FOXA2阳性或TUJ1阳性的神经系统细胞。

3.根据权利要求1或2所述的细胞聚集体，其在培养时能抑制细胞死亡。

4.根据权利要求1～3中任一项所述的细胞聚集体，其进一步具有选自以下的至少一个特征：

(a1)圆当量直径为100μm～2000μm，

(a2)包络度为0.5以上，

(a3)费雷特直径比为0.5以上，和

(a4)圆形度为0.3以上。

5.根据权利要求1～4中任一项所述的细胞聚集体，其在表面不具有碎片层且在显微镜下细胞聚集体的交界线清晰。

6.一种细胞聚集体的混合物，其为多个细胞聚集体的混合物，且包含总细胞聚集体数的50％以上的权利要求1～5中任一项所述的细胞聚集体。

7.根据权利要求6所述的细胞聚集体的混合物，其在选自由圆形度、最小直径、最大直径、垂直费雷特直径或水平费雷特直径、费雷特直径比、圆当量直径、周长、面积、以及周长的包络度或面积的包络度组成的组中的指标中的1个以上的指标中，具有15％以下的变异系数。

8.一种黏附性细胞群体的混合物的制造方法，其包括如下工序：

(1)在第一分化诱导因子的存在下对多个干细胞进行分化诱导，得到包含1个以上的处于第一分化阶段的神经前体细胞的多个细胞的工序；

(2)从工序(1)中得到的多个细胞中选择性分离处于第一分化阶段的神经前体细胞的工序，该工序包括：

在液体介质的连续流中，使工序(1)中得到的多个细胞悬浮，和

识别处于第一分化阶段的神经前体细胞，将处于第一分化阶段的神经前体细胞与并非处于第一分化阶段的神经前体细胞分离，以使其分别流入各个液体介质的连续流；及

(3)在第二分化诱导因子的存在下培养工序(2)中分离的处于第一分化阶段的神经前体细胞，从而得到黏附性细胞群体的混合物的工序，其中，

黏附性细胞群体的混合物包含总黏附性细胞群体数的50％以上的具有以下的(b1)和(b2)的特征的黏附性细胞群体，

(b1)包含处于第二分化阶段的神经系统细胞；和

(b2)包含1000个以上的细胞。

9.根据权利要求8所述的制造方法，其中，具有(b1)和(b2)的特征的黏附性细胞群体在培养时能抑制细胞死亡。

10.根据权利要求9所述的制造方法，其中，将黏附性细胞群体培养14～20天时，培养结束时的细胞数为培养开始时的细胞数的5％以上。

11.根据权利要求8～10中任一项所述的制造方法，其中，黏附性细胞群体的混合物为细胞聚集体的混合物。

12.根据权利要求11所述的制造方法，其中，黏附性细胞群体为细胞聚集体，所述具有(b1)和(b2)的特征的细胞聚集体的圆当量直径为100μm～2000μm。

13.根据权利要求12所述的制造方法，其中，具有(b1)和(b2)的特征的黏附性细胞群体为细胞聚集体，且还具有以下的特征：

(b3)包络度为0.5以上，

(b4)费雷特直径比为0.5以上，和

(b5)圆形度为0.3以上。