[发明专利]制造T细胞的方法

权利要求书

1.权利要求内容为：

一种转导T细胞的方法，其包括

解冻冷冻的外周血单核细胞(PBMC)，

静置解冻的PBMC，

用抗CD3抗体和抗CD28抗体激活静置PBMC中的T细胞，

用病毒载体转导激活的T细胞，

扩增转导的T细胞，以及

获得扩增的T细胞。

2.权利要求1中所述的方法，其中，激活步骤包括用固相支持物上的抗CD3抗体和抗CD28抗体固定静置PBMC中的T细胞。

3.权利要求1至2中任一项所述的方法，其中，静置步骤在约0.5小时至约48小时、约0.5小时至约36小时、约0.5小时至约24小时、约0.5小时至约18小时、约0.5小时至约12小时、约0.5小时至约6小时、约1小时至约6小时、约2小时至约5小时、约3小时至约5小时、或约1小时至约24小时、约2至约24小时、约12至约48小时、约0.5小时至约120小时、约0.5小时至约108小时、约0.5小时至约96小时、约0.5小时至约84小时、约0.5小时至约72小时或约0.5小时至约60小时的时间段内进行。

4.权利要求1至3中任一项所述的方法，其中，抗CD3抗体和抗CD28抗体各自的浓度不超过约0.1μg/ml、不超过约0.2μg/ml、不超过约0.3μg/ml、不超过约0.4μg/ml、不超过约0.5μg/ml、不超过约0.6μg/ml、不超过约0.7μg/ml、不超过约0.8μg/ml、不超过约0.9μg/ml、不超过约1.0μg/ml、不超过约2.0μg/ml、不超过约4.0μg/ml、不超过约6.0μg/ml、不超过约8.0μg/ml或不超过约10.0μg/ml。

5.权利要求1至3中任一项所述的方法，其中，抗CD3抗体和抗CD28抗体各自的浓度为约0.1μg/ml至约10.0μg/ml、约0.1μg/ml至约8.0μg/ml、约0.1μg/ml至约6.0μg/ml、约0.1μg/ml至约4.0μg/ml、约0.1μg/ml至约2.0μg/ml、约0.1μg/ml至约1.0μg/ml、约0.1μg/ml至约0.8μg/ml、约0.1μg/ml至约0.6μg/ml、约0.1μg/ml至约0.5μg/ml、约0.1μg/ml至约0.25μg/ml、约0.2μg/ml至约0.5μg/ml、约0.2μg/ml至约0.3μg/ml、约0.3μg/ml至约0.5μg/ml、约0.3μg/ml至约0.4μg/ml或约0.4μg/ml至约0.5μg/ml。

6.权利要求1至5中任一项所述的方法，其中，激活在不超过约1小时、约2小时、约3小时、约4小时、约5小时、约6小时、约7小时、约8小时、约9小时、约10小时、约11小时、约12小时、约14小时、约16小时、约18小时、约20小时、约22小时、约24小时、约26小时、约28小时、约30小时、约36小时、约48小时、约60小时、约72小时、约84小时、约96小时、约108小时或约120小时的时间段内进行。

7.权利要求1至5中任一项所述的方法，其中，激活在约1小时至约120小时、约1小时至约108小时、约1小时至约96小时、约1小时至约84小时、约1小时至约72小时、约1小时至约60小时、约1小时至约48小时、约1小时至约36小时、约1小时至约24小时、约2小时至约24小时、约4小时至约24小时、约6小时至约24小时、约8小时至约24小时、约10小时至约24小时、约12小时至约24小时、约12小时至约72小时、约24小时至约72小时、约6小时至约48小时、约24小时至约48小时、约6小时至约72小时或约1小时至约12小时的时间段内进行。

8.权利要求1至7中任一项所述的方法，其中，所述固相为珠、板、烧瓶或袋的表面。

9.权利要求8所述的方法，其中，所述板为6孔、12孔或24孔板。