[发明专利]使用三羟基和四羟基季铵化合物作为电泳分离的拆分剂

说明书

本公开提供了在使用凝胶的电泳分离中提高分析物的分离度的方法，所述方法为将有效量的一种或多种三或四羟基季铵化合物或此类化合物的混合物掺入到凝胶中。

相关申请的交叉引用

本申请要求2018年1月12日提交的美国临时专利申请号62/617,110的利益和优先权，通过提述将其内容并入本文用于所有目的。

联邦资金声明

不适用。

发明背景

本发明涉及通过将含有分析物的凝胶进行电泳分离来对分析物进行分析的领域。

在电泳中，分析物受到电力的作用，导致分析物迁移通过凝胶。通常，对一种或多种感兴趣的分析物进行标记，以便于在与样品中存在的其他组分分离之后将其检测和定量。

电泳是用于分析样品中存在的各种分析物的一系列技术之一。通常，将包含感兴趣的一种或多种分析物的样品上样到凝胶上，并使样品中的分析物在整个凝胶长度上受到电位的作用，从而使它们移动通过凝胶。电泳分离的多种形式是本领域已知的。这些形式包括但不限于平板凝胶、毛细管电泳(“CE”)、电过滤、差异凝胶电泳(“DIGE”)、区带电泳、等电聚焦(“IEF”)、非变性电泳、二维电泳、免疫化学/免疫固定电泳、固相pH梯度电泳、微芯片、移动界面电泳、等速电泳、脉冲场电泳以及它们的组合。在毛细管电泳中，技术包括基于分子大小来分离分子的毛细管凝胶电泳或“CGE”以及基于电荷:质量比来分离分子的毛细管区带电泳或“CZE”。

CE、CGE和CZEE在本领域中是熟知的，并且在文献中有广泛教导，包括BeckmanCoulter的小册子“Introduction to Capillary Electrophoresis”(未注明日期，但在1991-1992年之间)；Whatley，H.的“Basic Principles and Modes of CapillaryElectrophoresis”，Petersen和Mohammad编辑，“Clinical and Forensic Applicationsof Capillary Electrophoresis”，Humana Press,Inc.Totowa,NJ Totowa(2001)，和Laur和Rozing编辑的“High Performance Capillary Electrophoresis”，第2版，AgilentTechnologies Inc.,CA Santa Clara(2014)。数十年来，CGE一直用于分离蛋白质和核酸。参见，例如，Zhu等人，Anal Chim Acta.2012 Jan 4；709:21-31。

可以使用不同的电泳技术来分离各种类型的化合物。通过电泳技术将聚糖相互分离，特别是将N-聚糖分离，相比于蛋白质或核酸的相互分离更具挑战性，这是由于这些类型化合物各自的特征所致。参见，例如，Schwarzer等人，“N-glycan analysis by CGE-LIF；Profiling influenza A virus hemagglutinin N-glycosylation during vaccineproduction”，Electrophoresis 2008,29,4203-4214,第4204页。通常，将要通过CGE分析的聚糖用带电荧光团或紫外-可见染料标记，以允许通过例如激光诱导荧光(“LIT”)或通过UV光进行检测。参见，例如，Schwarzer(上文)，Reusch等人，“High-throughputglycosylation analysis of therapeutic immunoglobulin G by capillary gelelectrophoresis using a DNA analyzer”，2014,doi:10.4161/mabs.26712。