[发明专利]利用单一荧光通道聚合酶链反应设备的多重核酸检测方法有效
| 申请号： | 201980000712.4 | 申请日： | 2019-04-10 |
| 公开（公告）号： | CN110691853B | 公开（公告）日： | 2022-11-29 |
| 发明（设计）人： | 金仁寿;姜胤成 | 申请（专利权）人： | 尤迪比亚股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/686 | 分类号： | C12Q1/686 |
| 代理公司： | 北京聿宏知识产权代理有限公司 11372 | 代理人： | 吴大建;康志梅 |
| 地址： | 韩国忠*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 利用 单一 荧光 通道 聚合 反应 设备 多重 核酸 检测 方法 | ||
1.一种在单一荧光通道聚合酶链反应设备中对2个基因进行检测的方法，其特征在于，包括：
(a)利用第1基因的TaqMan探针以及第2基因的肽核酸(PNA)探针执行聚合酶链反应(PCR)的步骤；第2基因的正向(forward)引物与逆向(reverse)引物的引物比例为1:1；
(b)利用扩增信号(Amplification plot)对第1基因的检测进行确认之后，利用熔解曲线分析(Melting curve analysis)对第2基因的检测进行确认的聚合酶链反应(PCR)延伸(Extension)步骤。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：
步骤(a)中的上述TaqMan探针的使用浓度是1至10pmole/μl。
3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：
步骤(a)中的上述肽核酸(PNA)探针的熔解温度(Tm)值是30至60℃。
4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：
步骤(a)中的上述肽核酸(PNA)探针的使用浓度是5至50pmole/μl。
5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：
步骤(a)中的聚合酶链反应(PCR)是在95℃下执行3分钟之后再重复执行95℃，30秒，变性(Denaturation)步骤→55℃，30秒，退火(Annealing)步骤→72℃，30秒，延伸(Extension)步骤的过程。
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