[实用新型]质粒提取装置有效
申请号: | 201922193624.0 | 申请日: | 2019-12-09 |
公开(公告)号: | CN211713077U | 公开(公告)日: | 2020-10-20 |
发明(设计)人: | 孙相鑫;魏宏泉 | 申请(专利权)人: | 拓原合壹(宁波)生物技术有限公司 |
主分类号: | C12M1/12 | 分类号: | C12M1/12;C12M1/02;C12M1/00 |
代理公司: | 杭州裕阳联合专利代理有限公司 33289 | 代理人: | 姚宇吉 |
地址: | 315600 浙江省宁波市宁*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 质粒 提取 装置 | ||
本申请公开了质粒提取装置,包括存储体、反应室及纯化室,所述存储体上至少开设有7个存放腔,所述反应室内设置有滤网及滤膜,所述滤网及滤膜将反应室分隔成独立且连通的第一隔腔、第二隔腔以及第三隔腔,所述滤网的两侧分别为第一隔腔及第二隔腔,所述滤膜的两侧分别为第二隔腔及第三隔腔,所述纯化室内设置有GF膜,所述至少3个存放腔与所述第二隔腔相接,至少4个存放腔与反应室相联通,所述第三隔腔与所述反应室相联通。本实用新型具有如下有益效果:本装置能够快速地完成质粒的提取纯化过程中,操作方便。
技术领域
本实用新型涉及生物化学耗材领域,尤其涉及一种质粒提取装置。
背景技术
质粒是基因工程中非常重要的载体,目前质粒的提取方法大致可以分成两大步骤,第一步裂解,第二步纯化,其中裂解这个步骤又可以分为四个小步骤,第一个小步骤是对菌液进行除杂质预处理,第二个小步骤是添加1号试剂(50mM葡萄糖/25mMTris-HCl/10mMEDTA,pH 8.0),第三个小步骤是添加2号试剂(0.2N NaOH/1%SDS),第四个小步骤是添加3号试剂(3M醋酸钾/2M醋酸),完成上述四个小步骤后在进行过滤获取上清液。
第一步裂解得到质粒上清液后,利用GF膜吸附质粒,之后进行两次洗涤和一次洗脱得到质粒DNA。
上述过程中需要用到至少7种试剂以及多种仪器,操作需要反复使用离心管、移液器以及离心机等装置,操作十分繁琐。
实用新型内容
本实用新型针对上述问题,提出了一种质粒提取装置。
本实用新型采取的技术方案如下:
一种质粒提取装置,包括存储体、反应室及纯化室,所述存储体上至少开设有7个存放腔,所述反应室内设置有滤网及滤膜,所述滤网及滤膜将反应室分隔成独立且连通的第一隔腔、第二隔腔以及第三隔腔,所述滤网的两侧分别为第一隔腔及第二隔腔,所述滤膜的两侧分别为第二隔腔及第三隔腔,所述第二隔腔内活动设置有转子,所述纯化室内设置有GF膜,所述至少3个存放腔与所述第二隔腔相接,至少4个存放腔与纯化室相联通,所述第三隔腔与所述反应室相联通。
本装置的工作过程如下,首先存储体上的存放腔内存放有1号试剂、 2号试剂、3号试剂、BL平衡液、buffer WA、buffer WB以及TE缓冲液,工作过程如下所述
第一步:将细菌培养液倒进反应室的第一隔腔内,含有细菌的菌液进入第二隔腔内,由于滤膜的作用,菌体被拦截在了第二隔腔内,且反应室及纯化室上皆连接有真空泵,真空泵的作用是对反应室及纯化室抽真空,给了反应室及纯化室内的液体流动的动力。
第二步:依次加入1号试剂悬浮菌体,2号试剂裂解菌体,3号试剂将蛋白质和基因组DNA进行沉淀,上清中含有质粒,含有质粒的上清液经滤膜的过滤作用后进入纯化室,这个过程中第二隔腔内的转子转动搅拌液体(转子可以是一块磁铁,也可以是其他转动结构来实现),同时滤网可以对转子起到固定作用,防止转子转出反应室,这个过程中真空泵对反应室抽真空,给了反应室内的液体流动的动力。
第三步:在上清夜进入纯化室之前,先向纯化室中加入BL平衡液,利用BL平衡液洗涤GF膜,然后再加入上清液,上清液中的质粒被吸附在GF膜上,然后依次加入buffer WA以及buffer WB进行洗涤,洗涤完成后加入TE缓冲液,质粒被洗脱下来保存在TE缓冲液中,这个过程中真空泵对与纯化室连接的离心管室抽真空,给了纯化室内的液体流动的动力。
本装置能够全自动地快速完成质粒的提取纯化,操作方便。
需要进一步说明地是本装置也能用来提取其他核酸。
可选的,转子包括安装盘、转动盘以及转动柱,所述转动柱固定安装在转动盘上,所述转动盘安装在安装盘上,所述安装盘固定安装在第二隔腔内。
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