[实用新型]一种基于数字PCR技术检测HER-2基因拷贝数变异的试剂盒

说明书

一种基于数字PCR技术检测HER‑2基因拷贝数变异的试剂盒由盒体A、盒体B和盒体C组成。盒体A包括：1个盒体、1个海绵衬底、1个装有无核酸酶的超纯去离子水的1.5mL离心管、1个装有HER‑2检测引物及探针混合物的1.5mL离心管、1个装有CEP17检测引物及探针混合物的1.5mL离心管、1个装有EFTUD2检测引物及探针混合物的1.5mL离心管、1个装有EIF2C1检测引物及探针混合物的1.5mL离心管、12个装有相同体积数字PCR反应预混液并带独立管盖的八连管。盒体B包括：1个光滑玻璃纸衬底、1个卡槽隔盒、1个U盘卡槽、1个U盘、1个包括3组数字PCR芯片的数字PCR组件。盒体A和B为上下抽屉式结构放于盒体C中。本实用新型试剂盒完全基于一种新的实验方法而设计，使得检测更加精确、方便、快捷。

技术领域

本实用新型涉及一种基于数字PCR技术检测HER-2基因拷贝数变异的试剂盒，属于生物医学核酸检测试剂盒技术领域。

背景技术

乳腺癌是目前女性患者中排名第一位的常见恶性肿瘤。据2016年国家癌症中心统计显示，全国新发乳腺癌病例数达27.24万，每年死亡率超过7万。其中，15％～25％的乳腺癌患者都显示为HER-2基因过表达现象。HER-2/neu(又称c-erbB-2)基因为表皮生长因子受体家族成员之一，是一种原癌基因，研究表明，HER-2/neu基因扩增或过表达的乳腺癌患者易早期复发且存在生存期缩短的现象，因此，HER-2基因拷贝数变异是乳腺癌明确的预后指标和药物治疗效果的预测指标。目前，《乳腺癌HER-2检测指南(2011版)》仍推荐免疫组化(Immunohistochemistry，IHC)与荧光原位杂交(Fluorescence In Situ Hybridization，FISH)和(或)色素原位杂交(Chromogenicin Situ Hybridization，CISH)相结合的检测策略。但是，上述检测方法都存在各种弊端，IHC检测方法不仅存在不同的抗体和不同的实验人员都可能引发检测结果主观且不确定的结果，而且也受样本要求及缺乏判断标准等原因的制约；CISH方法则在研究数据支持方面远远低于IHC与FISH方法；FISH方法则需要冗长繁琐的染色和切片制备过程，整个过程是需要经过专业技术培训才能完成的，因此就会导致检测成本高，繁琐耗时长，实验结果判读过分依赖于实验人员经验的现象。因此，寻找一个简单、方便、准确并且可以实时监控乳腺癌相关发病基因是否高表达的检测方法，对于患者预后判断、治疗方案的选择都具有非常重要的临床指导意义。

数字PCR平台的出现为提高乳腺癌相关发病基因检测的准确性提供了很好的解决方案。数字PCR系统采用创新的微滴化技术，将含有DNA或RNA的PCR反应体系分成约20,000-30,000个微滴。经PCR扩增后，对每个微滴反应进行检测，有荧光信号的微滴判读为1，没有荧光信号的微滴判读为0，根据泊松分布原理及阳性微滴的个数与比例即可得出靶分子的起始拷贝数或浓度，从而准确的检测出HER-2基因是否存在拷贝数变异的情况来帮助患者选择相应的治疗方案。

实用新型内容

针对现有HER-2基因检测试剂盒的不足，本实用新型提供了一种基于数字PCR技术检测HER-2基因拷贝数变异的试剂盒，能够简单快速高灵敏度监控HER-2基因拷贝数的变化。

为了实现上述目的，本实用新型所采用的技术解决方案：