[发明专利]一种组合标志物在制备用于桂枝茯苓胶囊治疗原发性痛经效果评价产品中的应用

说明书

桂枝茯苓胶囊治疗原发性痛经在临床上缺乏客观的疗效评价指标。本发明人通过网络药理学计算预测和实验验证，发现桂枝茯苓胶囊调节胞内钙离子内流、干预COX2发挥抗炎止痛作用缓解原发性痛经，发现桂枝茯苓胶囊干预内分泌激素及微循环，调节子宫内循环，发挥持续效应。本发明涉及一个系统包括(TXB2、6‑Keto‑PGF1α、COX2、NO、ET‑1、胞内钙离子构成的一种组合生物标志物)在制备用于桂枝茯苓胶囊治疗原发性痛经效果评价产品中的应用。体外实验表明，桂枝茯苓胶囊显著降低血浆中TXB2、TXB2/6‑Keto‑PGF1α比值，显著升高子宫组织中NO，显著降低ET‑1水平，抑制COX2酶活性、子宫平滑肌细胞钙离子内流。临床试验表明桂枝茯苓胶囊止痛作用显著优于安慰剂，停药后具有明显的持续效应。

技术领域

本发明涉及医药领域，涉及一种组合标志物在制备用于桂枝茯苓胶囊治疗原发性痛经效果评价产品中的应用。

背景技术

原发性痛经(Primary Dysmenorrhea，PD)是指非生殖器官器质性病变引起的一种功能性痛经，严重影响患者的正常工作以及生活质量^[1]。其发病机制涉及前列腺素(PGs)、催产素(OT)、雌孕激素、β-内啡肽 (β-EP)等方面变化^[2]。

桂枝茯苓胶囊由桂枝、茯苓、牡丹皮、白芍、桃仁五味中药组成，具有活血化瘀、散结消癥之功效^[3]。桂枝茯苓胶囊药理作用多样，已有报道称，桂枝茯苓胶囊具有免疫调节、抗肿瘤、抗炎、镇痛、调节平滑肌、调节内分泌、改善血流变等广泛的功能^[4]，临床上主要应用于子宫肌瘤、盆腔炎、痛经、子宫内膜异位症、卵巢囊肿、乳腺增生等妇科疾病的治疗。但是，由于中药系统、机体生物系统两方面的复杂性，这些研究并不能很好地解释中药治疗病证的作用机理^[5]。如何识别出桂枝茯苓胶囊治疗原发性痛经的客观疗效指标，是目前桂枝茯苓胶囊在临床上广泛使用亟需解决的问题。

网络药理学“网络靶标-系统调节”研究模式突破了病证与药物研究脱节的局限^[6，7]，更加符合生物系统的本质。通过“网络靶标-系统调节”的研究模式解析中医药作用机制，为中药临床药理研究开拓一个新方法和新思路^[8，9]。“网络靶标-系统调节”思路以及方法较好的应用于理解中药方剂和天然药物的作用机理^[10，11]，进一步也为识别桂枝茯苓胶囊治疗原发性痛经的客观疗效指标提供新思路和新方法。

本发明人通过网络药理学计算预测和实验验证，发现桂枝茯苓胶囊治疗原发性痛经客观疗效评价生物标志物。

发明内容

本发明人通过对桂枝茯苓胶囊所含化合物进行靶标预测和生物功能富集分析，发现桂枝茯苓胶囊主要影响激素调节、炎症反应、微循环、钙离子内流、疼痛感知五个生物功能网络模块治疗原发性痛经。本发明人通过实验验证，确认桂枝茯苓胶囊调节胞内钙离子内流、干预COX2发挥抗炎止痛作用缓解原发性痛经，同时也可以干预内分泌激素及子宫微循环，发挥治疗原发性痛经的持续效应。

本发明人进行的体外实验表明，桂枝茯苓胶囊显著降低血浆中 TXB2、TXB2/6-Keto-PGF1α比值，显著升高子宫组织中NO，显著降低ET-1水平，抑制COX2酶活性、子宫平滑肌细胞钙离子内流。临床试验表明桂枝茯苓胶囊止痛作用显著优于安慰剂，停药后具有明显的持续效应。

根据本发明的一个方面，提供了检测一种标志物的表达水平的试剂在制备用于评价桂枝茯苓胶囊治疗原发性痛经效果的产品中的应用，其中所述标志物包括从以下成分中选出的至少一种：

血中的TXB2，

血中的6-Keto-PGF1α，

血中的COX2，

子宫组织中的NO，

子宫组织中的ET-1。