[发明专利]一种磁性纯化方法和系统在审
申请号: | 201911413057.3 | 申请日: | 2019-12-31 |
公开(公告)号: | CN113122422A | 公开(公告)日: | 2021-07-16 |
发明(设计)人: | 李璐;周郡;吴忠华;冯竹梅 | 申请(专利权)人: | 上海药明生物技术有限公司 |
主分类号: | C12M1/00 | 分类号: | C12M1/00;C12M1/42;C07K1/22;C12N15/10 |
代理公司: | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人: | 陶启长 |
地址: | 200131 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 磁性 纯化 方法 系统 | ||
1.一种易于移液的磁性分离装置,包括承载部,该承载部用于承载多容器盘,在所述承载部上垂直设置有多个数组排列的磁响应部件,所述磁响应部件均匀分布在所述多容器盘的各容器的周围,且所述磁响应部件的顶部高出容器底部2厘米以内。
2.如权利要求1所述的装置,其特征在于,所述装置具有选自以下的一个或多个特征:
每个容器周围均匀分布四个磁响应部件,
磁响应部件为圆柱体结构或方形柱体结构,
磁响应部件的顶部高出容器底部1厘米以内、高出0.8厘米以内、高出0.7厘米以内、高出0.6厘米以内、高出0.5厘米以内、高出0.4厘米以内、高出0.3厘米以内,
所述承载部的四角为方便不同裙边的多容器盘适用的倒角结构,
所述承载部的外周尺寸略小于多容器盘的裙边尺寸,
承载部与多容器盘相互卡固,使多容器盘固定在承载部上,
所述装置还包括设置在承载部上用于固定多容器盘的定位装置,
所述定位装置包括数个与多容器盘固定连接的支撑柱,支撑柱底端放置于承载部上开设的定位孔内,将定位装置定位在承载部上,
每四个磁响应部件之间的空间分别与多容器盘的一个容器相对应。
3.一种利用磁性颗粒从一个或多个容器中的介质中分离生物物质的方法,所述容器包含侧壁和底部,包括:
(1)将包含该生物物质的介质以及经处理能够与该生物物质关联的磁性颗粒接触并在该生物物质与磁性颗粒关联的条件下孵育,
(2)在容器的侧壁施加磁场,将磁性颗粒聚集到容器内侧壁,所述磁场覆盖侧壁周长的至少10%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%,从而可在水平方向上将磁性颗粒聚集到容器的多个方向的内侧壁上,优选所述磁场覆盖侧壁全周长,
(3)将容器中的介质移出,
任选的(4)撤销磁场,使用平衡液清洗捕获了生物物质的磁性颗粒,重复步骤(2)-(3),
(5)撤销磁场,使用洗脱液将生物物质从磁性颗粒洗脱,重复步骤(2)-(3),
任选的(6)使用中和液将生物物质调至适当pH。
4.如权利要求3所述的方法,其特征在于,所述磁场位于容器的下部,距离容器底部小于或等于容器全长的50%、40%、30%、20%、10%、5%、或1%。
5.如权利要求3所述的方法,其特征在于,所述磁场由权利要求1或2所述的磁性分离装置产生,其中,步骤(2)包括将多容器盘置于承载部具有磁响应部件的面上,从而磁响应部件在容器底部的四周聚集磁性颗粒。
6.如权利要求3所述的方法,其特征在于,所述生物物质是DNA、RNA、蛋白或多肽。
7.如权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤(1)中的磁性颗粒经活化,包括碱液处理、平衡液处理和/或水处理,优选具有选自以下的一个或多个特征:
所述碱液处理10分钟-2小时,
所述碱液是0.1M NaOH溶液,
所述平衡液与磁性颗粒的体积比为10:1,
所述平衡液为0.05~0.5M Tris缓冲液,pH 6.7~7.3。
8.如权利要求3所述的方法,其特征在于,
步骤(2)中的孵育包括震荡孵育;优选孵育时间为0.5~24h,和/或
步骤(3)中的抽吸包括利用负压将介质从容器移出的步骤;优选地,所述抽吸使用多通道枪头从多个容器中同时移出溶液,和/或
步骤(4)中的清洗包括震荡清洗;优选地,所述平衡液为0.05~0.5M Tris缓冲液,pH6.7~7.3;优选地,使用平衡液清洗多次,和/或
步骤(5)中的洗脱包括震荡洗脱;优选地,所述洗脱液为0.05~0.5M甘氨酸溶液,pH2.5~3.5;优选的,使用洗脱液洗脱多次,和/或
步骤(6)中的中和包括震荡中和。
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