[发明专利]一种竞争性均相化学发光测定试剂盒及其应用

说明书

本发明涉及一种竞争性均相化学发光测定试剂盒，其包括：第一组合物，其包含第一受体以及与之结合的第一抗体或其结合片段，所述第一抗体或其结合片段是特异性结合被分析物的检测抗体；第二组合物，其包含第二受体以及与之结合的第二抗体或其结合片段，所述第二抗体或其结合片段是特异性结合被分析物的检测抗体，所述受体能够与单线态氧作用产生化学发光；所述第三组合物，其包含与雌二醇竞争结合所述检测抗体的竞争抗原，所述第一抗体或其结合片段与被分析物特异性结合的亲和力高于所述第二抗体或其结合片段与被分析物特异性结合的亲和力；同时，所述第一抗体或其结合片段与第一受体的质量比低于所述第二抗体或其结合片段与第二受体的质量比。

技术领域

本发明属于均相化学发光技术领域，具体涉及一种竞争性均相化学发光测定试剂盒及其应用。

背景技术

竞争性免疫分析是一种用于小分子半抗原定量分析的检测方法。放射免疫分析(RIA)是最早建立的竞争性免疫分析方法，并荣获1974年度诺贝尔生理医学奖。在放射性免疫分析中，含有放射性核素标记的竞争抗原(标记抗原)和限量的特异性抗体，标本中待检抗原和作为试剂的标记抗原，分别竞争性与特异性抗体结合。分离结合标记物(B)和游离标记物(F)，并测定结合标记物的放射活性(或强度，单位每分钟计数，CPM)，放射活性与待检抗原呈反比例函数关系。采用系列已知浓度校准品，获得校准品的数学函数关系(校准函数，可简单理解为校准曲线)。未知标本按照校准品的同样条件操作，测定放射活性，再通过标准函数获得待测标本的浓度值。

在竞争性免疫分析中，竞争抗原的用量直接关乎竞争性免疫分析的功能灵敏度。此外，在竞争性免疫分析中，选择合适特异性抗体和使用浓度同样至关重要。化学发光分析具有很好分析性能，分析特异性、分析灵敏度、自动化操作等较好满足临床要求。但是，针对某些特殊指标如甾体类激素，对功能灵敏度和检测范围均有很高的要求，而现有化学发光免疫分析、电化学发光免疫分析、光激化学发光免疫分析等尚存在缺陷，不能有效兼顾功能灵敏度和分析范围的特殊要求。因此，亟需一种化学发光检测技术，其能兼顾功能灵敏度和分析范围的要求。

发明内容

本发明针对现有技术的不足，提供了一种竞争性均相化学发光测定试剂盒，利用该试剂盒进行检测时，同时具有优异的功能灵敏度和检测范围。

为此，本发明第一方面提供了一种竞争性均相化学发光测定试剂盒，其包括第一组合物、第二组合物和第三组合物，所述第一组合物包含第一受体以及与之结合的第一抗体或其结合片段，所述第一抗体或其结合片段是特异性结合被分析物的检测抗体；所述第二组合物包含第二受体以及与之结合的第二抗体或其结合片段，所述第二抗体或其结合片段是特异性结合被分析物的检测抗体，所述受体能够与单线态氧作用产生化学发光；所述第三组合物包含与雌二醇竞争结合所述检测抗体的竞争抗原；

所述第一抗体或其结合片段与被分析物特异性结合的亲和力高于所述第二抗体或其结合片段与被分析物特异性结合的亲和力；同时，

所述第一抗体或其结合片段与第一受体的质量比低于所述第二抗体或其结合片段与第二受体的质量比。

在本发明的一些实施方式中，所述第一抗体或其结合片段与所述第一受体的质量比选自1:(100～1000)，优选选自1:(200～800)，更优选选自1:(300～600)。

在本发明的一些实施方式中，所述第一组合物在所述试剂盒中的浓度高于所述第二组合物在所述试剂盒中的浓度。

在本发明的一些优选的实施方式中，所述第一组合物在所述试剂盒中的质量浓度与所述第二组合物在所述试剂盒中的质量浓度比为(2～50):1，优选为(2～25):1，更优选为(2～10):1。

在本发明的一些具体实施方式中，所述第一组合物在所述试剂盒中的质量浓度为5～500ug/ml，优选为10～250ug/ml，更优选为15～200ug/ml。

在本发明的一些实施方式中，所述第一组合物与所述第二组合物单独分散在同一种缓冲液中。