[发明专利]一种GLP-1类似物的转盐方法

说明书

本发明公开了一种GLP‑1类似物的转盐方法，包括以下步骤：1)样品制备：制备GLP‑1类似物的纯化馏分；2)样品稀释：用去离子水对上述纯化馏分进行稀释；3)样品浓缩：用超滤膜进行浓缩；4)样品转盐：用3)中的超滤膜进行转盐。本发明采用超滤技术进行转盐，比反相转盐的回收率更高；用超滤技术进行转盐，所得样品溶液无需经过减压浓缩即可进行冻干，工艺简单，整体效率更高；用超滤技术进行转盐，不必使用有机溶剂，不产生有机废液，成本下降的同时，也更为环保。

技术领域

本发明属于转盐方法技术领域，具体涉及一种GLP-1类似物的转盐方法。

背景技术

胰高血糖素样肽-1(GLP-1)是由人体肠道表皮细胞分泌的一种肽类激素，可促进胰岛素分泌、保护胰岛β细胞、抑制胰高血糖素分泌和抑制胃排空，具有降低血糖和减肥的功效，主要用于二型糖尿病的治疗。由于天然的GLP-1在人体内不稳定，容易被二肽基肽酶IV(DPP-IV)水解，因此药物研发企业开发了一系列的GPL-1类似物，提高了该类化合物对DDP-IV的抗性，延长了半衰期，如索玛鲁肽、利拉鲁肽等。

对于化学合成的GLP-1类似物的转盐，大多数是通过反相色谱技术实现，如专利CN104356224A、CN 109438569A和CN 107903318A等。专利CN 104356224A采用反相色谱技术制得醋酸盐形式的索玛鲁肽，专利CN 109438569A采用反相色谱技术制得醋酸盐形式的利拉鲁肽，CN 107903318A采用反相色谱技术制得磷酸盐形式的利拉鲁肽。反相色谱转盐时，必须要用到大量的有机溶剂，会产生大量的有机废液，一方面增加了溶剂使用成本和废液处理成本，另一方面也使制药企业面临着更大的环保压力；反相色谱转盐后的样品，还需要经过减压浓缩、除去大部分有机溶剂后，才能进行冷冻干燥，因而增加了工艺的复杂度、降低了效率；此外，反相转盐时，样品与反相填料之间通常存在死吸附作用，而且容易出现峰型拖尾的现象，使得样品难以被完全洗脱，最终导致反相转盐的回收率偏低。专利CN108359006A，则通过凝胶色谱法进行转盐制得无盐形式的索玛鲁肽。但同样使用了较多的有机溶剂、会产生较多的有机废液；葡聚糖凝胶转盐的上样量小、效率偏低，放大生产容易受限；转盐后的样品溶液，也需要经过减压浓缩、去除大部分有机溶剂后，才能进行冻干。反相色谱和凝胶色谱技术，虽然能实现索玛鲁肽和利拉鲁肽的转盐，但都存在一定的弊端。综合来看，反相色谱转盐和凝胶色谱转盐，在回收率、成本、效率和环保方面，并无优势。

为提高产品回收率和生产效率、降低生产成本和环保压力，在本发明中，使用的是超滤技术对GLP-1类似物的纯化馏分进行转盐。在整个超滤过程中，只需用去离子水对GLP-1类似物的纯化馏分进行稀释，无需使用任何的有机溶剂，降低溶剂成本，也减轻了环保压力；超滤完成后，无需进行减压浓缩处理，可直接进行冷冻干燥，简化了工艺，提高了效率；同时，提高了转盐过程中样品的回收率。

发明内容

为了解决上述背景技术中所提出的问题，本发明的目的在于提供一种GLP-1类似物的转盐方法。本发明采用超滤技术，对GLP-1类似物的纯化馏分进行转盐，最终转成无盐的形式。完成转盐后，直接进行冻干，最终得到GLP-1类似物精肽。

为了达到上述目的，本发明所采用的技术方案为：一种GLP-1类似物的转盐方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)样品制备：制备GLP-1类似物的纯化馏分；

2)样品稀释：用去离子水对上述纯化馏分进行稀释；

3)样品浓缩：用超滤膜进行浓缩；

4)样品转盐：用3)中的超滤膜进行转盐。

进一步地，4)后还包括样品冻干：对超滤截留液进行冻干，得到GLP-1类似物固体粉末。

进一步地，1)中所述GLP-1类似物的纯化馏分为采用任何纯化方法、超滤膜可以截留得住的GLP-1类似物纯化馏分。